Tp Sur La Réaction Enzymatique

tube S : 800µl de tp EDC pH 4,8 et 800µl de pNpp 2,5mM (substrat) tube E : 400µl de PPase dilué dans du BSA 0,1% (enzyme) On effectuera des dilutions 10x, 25x et 50x de l'enzyme -Mettre les tubes à chauffer au bain-marie à 37° pendant 3min. pour débuter la réaction Enzyme + substrat = Activation du substrat (pNpp devient pNp) : la réaction débute Ajout du substrat activé au NaOH à des temps différents (mettre dans la glace pendant au moins 1min. pour arréter la réaction) et ce pour chaques

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mesure de vitesses de réaction [P] = f (t) Introduction L'organisme est constitué de nombreuses protéines. Parmi celles-ci on distingue les enzymes, des catalyseurs biologiques intervenant dans les réactions biochimiques. Comme leur nom l'indique, leur unique rôle est de catalyser une réaction c'est à dire de faciliter celle-ci sans modifier les produits formés. Une enzyme agit sur un substrat pour le transformer en un produit sans intervenir dans l'équilibre de la réaction. De plus, une des

FRACTIONNEMENT CELLULAIRE, ISOLEMENT ET CARACTERISATON DES MITOCHONDRIES : II -] Matériel et Méthode : Dans ce TP, on manipule à froid pour figer, stopper l’activité des cellules et donc des organites en utilisant aussi de la glace pilée. Ici, on isole des mitochondries à partir de pommes de terre épluchées. En effet, ce féculent est épluché pour éviter qu’elles deviennent vertes à la lumière. Cette coloration témoigne de la présence de chloroplastes, éléments essentiel au phénomène de photosynthèse

Chapitre 1 TP n°1Glycémie et diabète Chapitre 1 TP n°1 Hydrolyse enzymatique de l’amidon L’amidon est une macromolécule de glucide contenue dans de nombreux féculents comme les pâtes ou le riz. Seuls les nutriments (molécules simples) sont absorbés par l’organisme, l’amidon doit donc être réduit, hydrolysé. Hydrolyse = réaction chimique au cours de laquelle il y a

de réserve glucidique pour la plante et fait l’objet de différentes utilisations alimentaires et non alimentaires. Les propriétés technologiques de l’amidon diffèrent suivant les proportions d’amylose et d’amylopectine. L’amylase est un complexe enzymatique (-amylase, -amylase, phosphorylase) qui catalyse la dégradation de l’amidon en maltose, destiné à alimenter le métabolisme végétal en sucres ou à servir de substrat glucidique au cours de procédés agroalimentaires comme la fermentation. Les processus

TP : ETUDE EXPERIMENTALE DE LA PHOSPHATASE ALCALINE BUT Nous allons déterminer les paramètres cinétiques d’une enzyme en étudiant l’influence de la concentration en substrat et celle de la présence d’un inhibiteur dans le milieu réactionnel. On va mesurer l’activité de l’enzyme en mesurant par spectrophotométrie l’apparition du produit de la réaction qui sera coloré. PRINCIPE Nous allons utiliser dans ce TP la phosphatase alcaline de veau. C’est une enzyme à 2 substrats qui à un pH optimal

TP ExAO / SVT - manipulations classiques en lycée – Agrég. interne S. Vitzthum / lieu du stage : lycée G. de la Tour ExAO : Expérimentation Assistée par Ordinateur - sommaire de la séance – Généralités sur l’ExAO / quelques erreurs à éviter. Niveau : seconde / Chapitre « L’organisme en fonctionnement » 1. ExAO : mesure de la consommation de dioxygène en relation avec l’effort physique chez l’Homme. 2. ExAO : spiromètrie et augmentation du débit ventilatoire au cours de l’effort. 3. ExAO : évolution

 Digestion enzymatique de l’amidon But : Le but de ce TP est de déterminer la température idéale à laquelle l'amidon réagir avec les enzymes présentes dans notre salive (amylase), en simulant différent cas in vitro. Principe : Pour cela il faut savoir que la présence d'amidon dans une solution peut être révélée par le test du lugol (mettre une goutte de lugol dans la solution) qui est positif si la préparation vire au noire et qui est négatif si la préparation devient noire Il faut donc

formation d’un ion phosphate et d'un alcool (ou d’un phénol), selon la réaction : R-O-PO3 2- + H2O  R-OH + HPO4 2- Méthodologie Le but du TP est d’étudier l’influence de la concentration de initiale substrat ([S]0) et d’enzyme totale ([E]0) sur la vitesse de la réaction d’hydrolyse du para-nitrophenyl phosphate (pNPP) catalysée par une phosphatase intestinale de veau (Figure 1). Pour rappel, la vitesse d’une réaction enzymatique dépend de [S]0 (fonction hyperbolique) et de [E]0 (fonction linéaire)