Plasmide

étape consiste à cloner le gène YFG dans un plasmide. Un plasmide est une petite molécule d'ADN circulaire qui se multiplie en même temps que les chromosomes. Pour obtenir de grande quantité de ce plasmide celui-ci est tout d'abord introduit dans une bactérie -E. coli-(l'avantage d' E. coli est qu'elle se multiplie très rapidement). Généralement un antibiotique est utilisé pour ne permettre la croissance que des bactéries qui ont reçu le plasmide (le plasmide porte un gène de résistance à l'antibiotique)

Agrobacterium tumefaciens vit dans le sol. Quand elle rentre en contact avec la tige blessée d’un végétal supérieur elle transfert un petit morceau de son ADN circulaire ( = plasmide ) dans la cellule végétale avec laquelle elle est en contact. Ce morceau d’ADN transféré est appelé ADN-T. Ce morceau d’ADN est issu du plasmide de la bactérie ; Après l’entrée de l’ADN-T dans la cellule végétale, il s’intègre au génome de la cellule c'est-à-dire qu’il s’introduit dans l’ADN du noyau et modifie le génome

           Pour transférer les plasmides on utilise une autre espèce de bactérie du nom de Agrobacterium tumefaciens. Cette bactérie peut en effet introduire des fragments précis de son ADN dans le génome d'une plante. On doit donc transférer le plasmide entre  les bactéries Escherichia Coli et les bactéries Agrobacterium tumefaciens avant de l'insérer dans les plantes.              On utilise pour cela la méthode par conjugaison (voir le schéma ci-dessous). Une fois les plasmides insérés dans la bactérie

à un stade de son développement. * Dans certains cas, l'insertion du transgène dans un vecteur. Ce vecteur peut comporter des séquences de régulation, réplication ou encore des marqueurs de sélection. Les vecteurs les plus connus sont les plasmides, petites boucles d'ADN d'origine bactérienne. Les séquences de régulation comportent obligatoirement un promoteur adapté à l'organisme receveur. Les marqueurs de sélection sont généralement des gènes de résistances à des antibiotiques ou des herbicides

sélection des plantes pour améliorer les plantes cultivées, mais l'introduction d'une technologie particulièrement puissante et précise pour faciliter sa mise en œuvre. Voici quelques dates : 1973 : Identification du plasmide Ti dans la bactérie Agrobacterium tumefaciens. Ce plasmide permet d’accueillir le gène porteur du caractère recherché. 1980 : Le Premier brevet déposé sur un OGM est déposé aux Etats-Unis pour une bactérie capable de digérer les hydrocarbures. 1983: Premiers essais en laboratoire

de protoplastes (cellules végétales sans paroi) et d’ADN à des chocs électriques. Le champ électrique provoque alors la déstabilisation de la membrane, facilitant le passage de l’ADN  dans le noyau. Ces protoplastes baignent dans une solution de plasmides. Ces derniers passent donc très facilement dans la cellule qui se trouve à son tour génétiquement modifié. Cette manipulation est possible car le phénomène d’ouverture des pores est réversible. En effet si le choc électrique n’a pas été trop violent

151pb =867pb). 2° Un plasmide est un vecteur de clonage de petite taille d’origine bactérienne. Il correspond à de l’ADN circulaire extra chromosomique présentant une origine de réplication (il se sert de la bactérie dans laquelle il est pour se répliquer). Le plasmide possède également des sites des restrictions correspondant à des sites de reconnaissance pour des enzymes des restrictions (cela permet d’insérer ce que l’on veut étudier). On va insérer le plasmide dans une bactérie. Certaines

Définition d’un microorganisme hétérotrophe ? Ce sont des microorganismes qui ne peuvent utiliser des molécules organiques préformées, réduites comme source de carbone. 10- Quel est le role des porteurs de germes en épidémiologie ? 11- Définition d’un plasmide ? Ce sont des molécules circulaires à ADN double brin qui se répliquent indépendamment du chromosome. 12- Parlez du système du complément dans les défenses non spécifiques ? 13- Définition d’un microorganisme hétérotrophe ? Ce sont des microorganismes

chromosome sous forme de filament d’ADN(1), support de l’hérédité. Le chromosome bactérien est en général circulaire. En plus de cet ADN, les cellules bactériennes contiennent souvent des molécules d’ADN circulaire extra-chromosomiques appelées plasmides(2). Il existe 2 types de résistance aux antibiotiques : -les résistances naturelles : certaines bactéries sont automatiquement résistantes à des antibiotiques. Cette résistance est programmée dans le génome de la bactérie résistante. Ex : les mycobactéries sont

l'hôte: On utilise généralement une bactérie (E. coli) parce qu'elle a un temps de génération court (20mn. à 37°C) B/ Un vecteur : Les plasmides Les plasmides sont de petits morceau d'ADN circulaires, double brin que l'on trouve dans les bactéries en dehors du chromosome. Ils se répliquent grâce aux enzymes présents dans la bactérie. Les plasmides Le chromosome C/ Les enzymes de restriction Les enzymes de restriction sont une sorte de ciseaux moléculaires servant à couper l'ADN en