Absorbance

compartiment récepteur à temps 5, 10, 15, 20, 30, 40, 50 et 60 minutes. Ce test est effectué avec deux appareils en parallèle pour deux membranes. La solution prélevée est mesurée au spectrophotomètre à 249 nm et diluée si nécessaire pour avoir une absorbance dans le domaine de linéarité. Il est ensuite possible d’établir un graphique donnant le pourcentage de produit passant à travers la membrane par rapport à la dose totale en fonction du temps. Ce test permet d’établir le profil de libération

protéines par méthode de Bradford Les extraits sont conservés dans la glace. On réalise une gamme étalon à partir d’Albumine de Sérum Bovin (S.A.B.) : C en µg/mL 0 20 40 60 80 100 V SAB (mL) 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 V eau (mL) 0 1.8 1.6 1.4 1.2 1 Absorbance 0 0.016 0.044 0.077 0.082 0.121 Pour chaque extrait, insérer dans un tube à hémolyse : - 100 µL de chaque tube de la gamme et ajouter 2 mL de réactif de Bradford - 100 µL d’extrait et 2 mL de réactif de Bradford Homogénéisation et laisser

des solutions inscrites dans le tableau et on mesure leur absorbance A à une même longueur d’onde.Numéro de la solution123456V0 Volume de la solution mère à prélever en mLC : concentration massique en tartrazine de la solution en mg . L-151012,5152025Volume de la solution préparée en mL202020202020A :Absorbance de la solution0,270,500,610,751,021,23Pour le YODA SODA dilué 10 fois , on obtient dans les mêmes conditions une absorbance égale à A = 0,65 1.2.1. Etablir en la justifiant

Noter ces concentrations dans le tableau II, page 9. Tableaux des résultats Tableau I Spectre d’absorption de la solution C du colorant jaune (Tartrazine) Longueur d’onde(± 2 nm) | Absorbance(±0,005) | | (… suite) Longueur d’onde | (… suite) Absorbance | | (… suite) Longueur d’onde | (… suite) Absorbance | 380 | 0,402 | | 485 | 0,153 | | 590 | -0,001 | 385 | 0,447 | | 490 | 0,107 | | 595 | 0 | 390 | 0,495 | | 495 | 0,062 | | 600 | 0,001 | 395 | 0,530 | | 500 | 0,034 | | 605

de Beer-Lambert qui s’écrit à sous la forme de l’équation 1. A1/A2=C1/C2 (1) Où : A1= absorbance échantillon 1 (permanganate de potassium), C1=concentration de la solution (mol/L) échantillon 1 (permanganate de potassium) A2=absorbance échantillon 2 (solution inconnue), C2= concentration de la solution (mol/L) échantillon 2 (solution inconnue) 0,95/0,18=20,0/C2 5,2777=20,0/C2 5,2777C2=20,0 C2=3,7895

plus la lumière est arrêtée et plus l’absorbance est importante. |Absorbance |0 |6 |11 |21 |45 |88 | |Nombre de chlorelles |0 |0,7. 103 |1,7. 103 |3,6. 103 |6,5. 103 |13. 103 | |par mL | | | | | | | Tableau donnant les valeurs de référence absorbance/nombre de chlorelles par mL |Composants et facteurs du milieu

Fréquemment exposé .. °Phénylalanine Anneau aromatique Hydrophobe Chaine latérale très volumineuse Absorbance UV (très faible , 254nm) °Tyrosine Anneau aromatique (stacking pi) Hydrophobe Liaison hydrogène Chaine latérale très volumineuse Absorbance (277nm , x5) °Tryptophane Anneau aromatique (stacking pi) Hydrophobe Liaison hydrogène Chaine latérale très volumineuse Absorbance (282nm, x25) °Histidine Chaine latérale cyclique Ionisation à pH physiologique Nombreuses possibilités

1. Spectrophotométrie / mesure absorbance ou densité optique DO On utilise la loi de BEER- LAMBERT : ε est défini pour chaque composé, il dépend de la nature de la solution Si l = 1 cm alors A = ε x C l’absorbance est proportionnelle à la concentration Longueur d’onde = 260 nm

Phénol : 12. Valeurs lues des absorbances sur le spectrophotomètre. Cuve n°2 : étalon Absorbance = A2 = Valeur moyenne : Cuve n° 3 : étalon Absorbance = A3 = Ae = ( A2+ A3)/2 = Cuve n° 4 : solution A’ Absorbance = A4 = Valeur moyenne : Cuve n° 5 : solution A’ Absorbance = A5 = Aa’ = ( A4+ A5)/2 = 13. Déduire de la loi de Beer-Lambert la relation entre l’absorbance lue pour la solution de glucose étalon Ae , l’ absorbance de la solution A’ : Aa’ , la concentration

sur le vert. La solution du haut, elle, absorbe les même couleur sauf le vert qui pour elle est moins marqué. 4-Exploitation des résultats_ Spectres d'absorptions Chlorophylle brute Extrait du haut Extrait du bas Absorbance bleu OUI OUI OUI Absorbance vert Absorbance jaune Absorbance rouge LEGERE NON LEGERE NON NON NON OUI OUI OUI On peut observer sur chacun des spectres une absorption du bleu et du rouge. Les spectres sont similaires, certes ils sont différents mais ils adoptent tous le schéma