Castel Beer

Rapport TP de chimie I. Exploitation des résultats  Données issues de la spectroscopie : L’espèce Z=Ce4+ est celle à considérer pour l’absorbance de la solution. La loi de Beer-Lambert nous permet alors d’avoir sa concentration dans la solution : Avec : est l’absorbance ou la densité optique de la solution pour une longueur d'onde λ (ici 340nm) (en mol.m-3) est la concentration de la substance absorbante (en m) est la longueur du trajet optique (ici l=1cm) est le coefficient d’extinction

(III), donc : 2 xmax = 2,0 mol, final on a : n0 (O2) – 3 xmax = 0, soit n0 (O2) = 3 xmax = 3,0 mol. soit xmax = 1,0 mol. 3. Dans l’état final : voir le tableau en fin de chapitre, p. 37. Le graphe est une droite passant par l’origine : la loi de Beer-Lambert est vérifiée. 4.  Le dioxygène étant le réactif limitant, dans l’état 4 1. 2. La droite A1 = 1,05 coupe la courbe d’étalonnage en un point dont l’abscisse est : C1 = 31 mmol · L–1 = 3,1 ¥ 10–2 mol · L–1. 2,0 1,6 1,2 0,8 0,4 0,0 0

enzymatique nulle. Dans le tube T1, sans enzyme, il n’y a aucune libération de maltose et dans le tube T2 sans substrat l’enzyme n’agit pas. ▪ Cinétique enzymatique : L’absorbance mesurée rend compte de la concentration en Maltose formé (loi de Beer-Lambert A340 = l.ε). A partir des résultats obtenus des tubes 1 à 7, on trace la courbe A540 = f(t) fournie en annexe. La tangente à l’origine permet de déterminer la vitesse initiale Vo. ▪ Changement de milieu : Dans le tube 10, on a

l'activité enzymatique de l'extrait, on réalise une cinétique de celle-ci par spectrophotométrie. La LDH catalysant la transformation du lactate en pyruvate (et inversement), on suit l'oxydation du lactate absorbant a 340 nm. ensuite d'après la loi de Beer-Lambert, on calcule la concentration du lactate en fonction du temps, A= є . l. C avec a= absorbance (UA) є= coefficient d'extinction molaire (M-1.cm-1) C=concentration (mol-1) plus le taux de lactate diminue plus l'activité enzymatique

radiation est totalement absorbée. L’absorbance d’une solution dépend de la nature de l’espèce chimique dissoute, de la nature du solvant, de la radiation incidente, de l’épaisseur de solution traversée et de la concentration de la solution. Loi de Beer-Lambert : A(lambda) = E(lambda)*l*c pour une solution pas trop concentrée. E(lambda) le coeff d’extinction en cm-1.mol-1.L ; l l’épaisseur de la solution traversée en cm et c la concentration en mol.L-1. Or E*l est une constante donc A(lambda)=kc

d’une longueur d’onde fixe telle qu’il peut être absorbé par la molécule. Dans ces conditions, l’absorption est directement proportionnelle à la concentration de la molécule en solution. Cette relation de proportionnalité est énoncée par ma loi de Beer-Lambert : la transmission du REM à travers une solution est T = I/I0. Cependant c’est la densité (DO) ou absorbance qui est proportionnelle à la concentration de la molécule. DO = log(1/T) = (LC ( est le coefficient d’extinction molaire, caractéristique

la solution à 340nm. En effet la NADH est le seul produit de la réaction à absorber la lumière à cette longueur d’onde (alors qu’à 260nm, le NAD+ et le NADH absorbent la lumière) ce qui permet de déterminer sa concentration en solution par la loi de Beer-Lambert. 3. Résultats Mesure de l'activité spécifique : On obtient une absorbance croissante pour l'extrait initial de tissu et pour la fraction éluée 1.On en déduit que la fraction contient la LDH purifiée. L'extrait contient aussi d'autres

L’intensité : I = No. des photons / sec I ~ énergieM / sec /énergie1-photon I ~ A2 (Les détecteurs sont incohérents!) Absorption RX Absorption de RX (absorption photoélectrique) dz I0 I(z) z  dI  I  dz I ( z)  I0 e z Loi de Beer-Lambert Absorption RX µ fluorescence Réflexion et réfraction n c  , n  1    i   10 5  10 8 ,    c ? Loi de Snellius - Descartes n ~ 1.5 - 2 cos   n cos  '   C ,  '  0  C  2 Réflexion

dans le foie BUT : La manipulation se déroule en deux temps, il faut en premier lieu extraire le glycogène du foie puis dans un deuxième temps réaliser le dosage de l'échantillon obtenu par rapport à une gamme étalon en utilisant la méthode de Beer-Lambert . Principe Il s’agit de comparer l’absorbance de la solution de glycogène obtenue par l’extraction à celle d’autre solution de concentration connue Mode opératoire a. Matériels Balance, Broyeur mortier, Fiole à vide, Bêcher, Éprouvette

Analyse Spectroscopie * Spectroscopie ultraviolette Composés qui ne contiennent que des groupements fonctionnels simples. * Spectroscopie visible Composés qui comprennent plusieurs groupements fonctionnels conjugués. * Loi de Beer-Lambert L’absorbance d’une solution d’un composé est proportionnel à la concentration du composé en solution. * Valable à faible concentration Absorbance étalon = absorbance inconnu Concentration étalon concentration inconnu