Chymotrypsine

libéré du site actif. La réaction peut être schématisée ainsi : E + S ↔ E-S ↔ E-P ↔ E + P Le cycle catalytique d’un enzyme • L’étude de la catalyse enzymatique nécessite de disposer d’un schéma réactionnel Mécanisme réactionnel de la chymotrypsine : 1°) Fixation du substrat : 2°) Formation du complexe E-S : 3°) Début de l’hydrolyse : Libération du produit P1 et Formation du complexe E-S’ : 4°) L’hydrolyse se termine … Les formes transitoires (E-S…) sont appelées « intermédiaires

et la saccharase qui découpe le saccarose Les lipases  : découpent les molécules de triglycérides, formation de glycérol et d’acides gras libres Les protéases = trypsine et chymotrypsine : découpent des protéines en polypeptides, sécrétées sous forme de trypsinogène et de chymotrypsinogène (forme inactive au niveau du pancréas) activées dans le duodénum par l’entérokinase. Les voies biliaires :Voies biliaires intra

active de PM 26700. Cette enzyme d’origine bactérienne (genre Bacillus) catalyse l’hydrolyse d’esters et d’amides à l’aide d’une triade catalytique Ser221, His64 et Asp32 jouant un rôle identique à celui des résidus Ser195, His57 et Asp102 de la chymotrypsine et autres protéases pancréatiques des vertébrés. Carter et Wells ont décrit en 1987 les résultats d’expériences de mutagénèse dirigée effectuées sur le gène de la subtilisine de B. amyloliquefaciens. Dans l’enzyme mutée obtenue, l’histidine

de ces acides aminés, ce qui va permettre la digestion . Elle est efficace à pH 7,5 - 8,5, elle est inactivée et digérée en quelques heures à pH neutre (=7) dans l'intestin. La trypsine participe à l'activation d'autres enzymes comme l'alpha-chymotrypsine par coupure hydrolytique de la chaîne polypeptidique du chymotrypsinogène. Cette enzyme sert également lors de la 2e semaine du développement embryonnaire humain. Elle est sécrétée par le trophoblase afin de digérer la zone pellucide entourant

| | |On précisera la terminologie des enzymes : nom + ase et on notera | | | |quelques exceptions : pepsine, trypsine, chymotrypsine. | | | |L’analyse de ces expériences fera appel aux réactions de | | | |caractérisation

dans une forme inactive : on ne veux pas digérer notre pancréas. La forme inactive : ZYMOGENE et elles seront activé dans l’intestin grêle. Exemple : ZYMOGENE ex : LE TRTPSINOGENE → TRYPSINE activée par ENTEROKINASE (intestin) CARBOXYPEPTIDASE et CHYMOTRYPSINE Activés par la TRYPSINE a) la régulation du suc pancréatique elle est assurée par le système parasympathqiue et par les hormones des cellules endocrines. La stimulation des nerfs vagues 9 & 10 provoque la libération de suc pancréatique. Pendant

le bout C-terminal. 57 3. Les molécules 3.4. Les Protéines PEPTIDES ET PROTEINES Hydrolyse spécifique des liaisons peptidiques N C GIEFQC K C F ASV Y CSLYQL R EN T YCN F = Phe Y = Tyr T = Trp K = Lys R= Arg 58 Pepsine (F,Y) Chymotrypsine, (F, Y, T) Trypsine (K, R) 3. Les molécules 3.4. Les Protéines LA SYNTHESE PROTEIQUE a b c d Chaîne d’acides ADN ARNm aminés (protéine) 59 3. Les molécules 3.4. Les Protéines LA SYNTHESE PROTEIQUE La transcription:

est important d’effectuer ce type de chromatographie. Une classification conventionnelle des types de phases stationnaires chirales est utilisée ici: Affinité chirale par des protéines (albumine sérique, acide a1-glycoprotéine, ovomucoïde et chymotrypsine). Accès stéréosélective à polymères chirales hélicoïdales (polysaccharides dérivés ou libre). Interactions stériques entre les donneurs et accepteurs de groupes amides aromatiques chiraux (Pirkle). Complexe d’inclusion (Interactions à l'intérieur

protéines A et B sont digérées par la chymotrypsine et le peptide comportant ou non la mutation (peptide A ou peptide B) est isolé du mélange de peptides par différentes étapes chromatographiques. Peptide A : Peptide B : Arg-Ile-Asp-Ala-Leu-Ile-Gly-Phe Arg-Ile-Asn-Ala-Leu-Ile-Gly-Phe 1- Orienter sur les deux peptides A et B les extrémités N- et C-terminales (1 pt) 2- Quel type de résidu précède le résidu N-terminal des peptides obtenus par traitement par la chymotrypsine ? Le (les) nommer. (2 pts)

coupures sont très localisées dans la protéine. Enzymes utilisés avec son site d'Action : Enzyme | Site d'action : | Spécificité : | | TRYPSINE | Extrémité C-terminale | LYS , ARG (sauf si PRO est à droite) | | Ex: | | | | CHYMOTRYPSINE | Extrémité C-terminale | PHE TYR TRP (sauf PRO est à droite) | | Ex: | | | | PEPSINE | Extrémité N-terminale | PHE, TYR, TRP, LEU, ASP, GLU (sauf si PRO est à gauche) | | Ex: | | | | THERMOLYSINE | Extrémité N-terminale