Électrophorèse

lysozyme présent dans le blanc d’œuf grâce à une technique de chromatographie sur colonne de carboxyméthyl cellulose, échangeuse de cations ; puis de déterminer la présence de lysozyme par un test enzymatique et enfin, sa pureté, grâce à une électrophorèse. Matériel et méthode 1) Purification du lysozyme On récupère le lysozyme dans le blanc d’œuf (car il n’est pas présent dans le jaune d’œuf) par filtration sur gaze, puis sur papier filtre. Le filtrat obtenu constitue

urique Albuminémie (Méthode immunologique) Ammoniémie Bilirubine (Totale Directe et Indirecte) CalciumChlore Cholestérol total Cholestérol estérifié Cholestérol H D L LDL Cholestérol HDL +LDL Créatinine Electrophorèse de l'Hémoglobine Electrophorèse des lipides Electrophorèse des protides Fer sérique Fer sérique+C TF Fructosamine Glycémie Hémoglobine glycosylée Ionogramme complet (Na, K, CI, Prot, RA, Lipides Lipoprotéine A Lipoprotéine B Lipoprotéines A+B Lithium Magnésium

ml d’ eau distillé - Mesurer l’absorbance λ1 (à 260nm) = 0.071 pour l’ADN λ2 (à 280nm)= 0.039 pour les protéines. Rapport = 1.789 Concentration = 0.071x 50 = 3.55 μg/ml Troisième Séance : Eléctrophorèse Sur Gel • Principe : Les protéines sont séparées en fonction de leur masse molaire par électrophorèse en présence de SDS sur gel de polyacrylamide de concentration uniforme dans un système à cuves verticales. • Methodologie : La Préparation du gel D’agarose à 1% : (1g agarose/ 100ml TBE ). TBE:

activités de l'entreprise ou du laboratoire. Compétences techniques et théorie que les étudiants sont censés maîtriser en début de stage (selon leur parcours) : Techniques: Chromatographies (couche mince, échangeuse d’ions, exclusion) ; Electrophorèses d’acides aminés, de protéines, d’ADN ; Enzymologie (cinétique et activité enzymatique) ; Dosages colorimétriques des protéines ; Techniques d’immunodiffusion; méthode ELISA, Extraction d’ADN ; Extraction et purification de protéine ; Utilisation

renseigner I.N.R. TP TCA Héparinémie Fibrinogène 2.0-3.0 >65 23-36 0.20-0.30 2.50-5.00 % s U/ml g/l Normes CH CAHORS 09/12 -3- NORMES BIOLOGIQUES Electrophorèse Albumine Alpha 1 Alpha 2 B 1 globulines B 2 globulines Gamma globulines Graphe Commentaire 36-48 2.1-3.5 5.1-8.5 3.4-5.2 2.3-4.7 8.0-13.5 {A} g/l g/l g/l g/l g/l g/l {A}Graphe électrophorèse Normes CH CAHORS 09/12 -4- 

807 4. Intérêt du plasmide pUT 807 II. Principe des méthodes utilisées. 1. La PCR 2. Intérêt de la PCR et conditions opératoires 3. Réactions enzymatiques : restriction et ligation 4. Electrophorèse en gel d’agarose a) Migration/Séparation b) Conditions opératoires c) Visualisation d) Purification III. Résultats et discussion 1. Gel 1

endopeptidase, trypsine(enzyme de l’estomac), chymotrypsine -Cartes peptidique Digestion de la proteine en peptides Permet de distinguer des differences en AA dans une proteine Electrophorèse bi dimensionnelle 1- Séparation par le point isoelectrique (pl) : isoelectrofocalisation (IEF) 2- Electrophorèse en gel acrylamide bis-acrylamide (SDS-PAGE) SDS charge negativement toutes les proteines migration selon le PM. Soumission a& une charge electrique car il peut y avoir migratio

Vitesse de sédimentation, Numération Formule Plaquette, Groupage sanguin, Recherche d'Agglutination Irrégulière. Avec Ahutea, Kathia et Véronique. Service Biochimie Electrophorèse avec Christian. Mardi 13 avril 2010 Service Biochimie Tous les matins, calibrage des appareils et maintenance. Poste Electrophorèse, Chromatographie (glucose dans les hématies), Analyse des sérums. Avec Christian et Vanessa. Mercredi 14 avril 2010 Service virologie Détection et/ou quantification des

concentration d'anticorps correspond à celle d'antigène : apparition d'un trouble : - turbidimétrie : mesure du rayonnement absorbé - néphélémétrie : mesure du rayonnement diffusé (plus sensible). 4. Immuno-électrophorèse : - technique qualitative en 2 temps. - exemple : immuno-électrophorèse de protéines sériques • 1er temps : séparation des protéines sous l'action du champ électrique. Les protéines sont séparées selon leur charge et leur PM • 2ème temps : révélation des protéines séparées par

DUDLEY Etudiant : Elise Absa NGOM Sommaire Introduction .....................................................................3 I) Matériel et méthodes 1- Purification de la stathmine …………………………………….5 2- Electrophorèse …………………………………………………………6 3- Western blot …………………………………………………………….8 4- Dosage de la tubuline ……………………………………………….8 5- Cosédimentation ……………………………………………………..9 II) Résultats et discussion 1- Purification de la stathmine ……………………………………