Électrophorèse

Indexage: indicateur, Mme Vinous Température: 18 -22°C Symptômes: 7-12mois Indexage: Indicateur Cédratier étrog 861 Température: 28-32 "C Apparition des symptômes: 3-4 semaines Suivi par électrophorèse Indexage : Indicateur, Cédratier etrog 861 Température: 28-32"C Apparition dessymptômes: 7-12 mois Suivi par électrophorèse Indexage: Indicateur, Mme Vinous Température: 28-32"C Apparition dessymptômes: 6 mois Tristeza Psoroses Exocortis Cachexie Stubborn - La sérologie (test ELISA)

mettre en place la digestion d’ADN plasmidiques issus de deux clones différents, par différentes enzymes de restriction et ainsi pouvoir déterminer si le clonage a réussi. Pour cela, nous allons réaliser la digestion de l’ADN puis effectuer une électrophorèse. Matériel et méthodes : Pour faire ce tp, nous allons utiliser des ADN plasmidiques issu de deux clones différents pUC-L1 et pUC-L2 fournis en solution à 0,5 µg d’ADN/µl. Nous allons également utiliser deux enzymes de restriction, soit

l’albumine sérique de bovin (BSA) et une protéine inconnue Y à déterminer. Une première manipulation consistera à faire migrer par électrophorèse, de la BSA, des isoLDH, des protéines inconnues Y et un marqueur de taille, tous monomères, sur un gel de migration dénaturant SDS. La deuxième manipulation consistera quant à elle à faire migrer, toujours par électrophorèse, des isoLDH et de la BSA natives sous forme de polymères sur des gels de migration non dénaturants ND à différents pourcentages d’acrylamide

( Le phénotype à l’échelle moléculaire. Chaque hématie contient environ 300 millions de molécules d’hémoglobine. On cherche à savoir s’il existe une ou des différences au niveau de la structure des molécules d’hémoglobine. a) On réalise une électrophorèse des molécules d’hémoglobine normale Hb A et anormale Hb S : l‘exploitation des résultats de l’électrophorèse s’effectue à partir du document annexe fourni. b)la structure de l’hémoglobine Pour déterminer la structure de l’hémoglobine normale

(1400 : salaire débutant). Technicien de laboratoire : Ils réalisent les gestes techniques et les analyses biologiques nécessaires à la bonne délivrance des produits sanguins labiles. Bac +3. Les empreintes génétiques : réalisation d'une électrophorèse. Site : le southtern blot université Rouen (important) Le procédé : l'ADN extrait de plusieurs cellules nuclées est découpé par des enzymes (?) en fragments de tailles variées : la taille est spécifique de l'information génétique de chaque

l'agarose à bas point de fusion, car ceci évite de casser les molécules d'ADN. Celles-ci y sont digérées partiellement ou complètement par une enzyme de restriction qui génère des extrémités droites. On isole des fragments de plus de >200 kb par électrophorèse en champs alternés. Ces fragments récupérés dans des blocs d'agarose sont liés aux bras du vecteur qui sont traités à la phosphatase alcaline pour empêcher leur religation. Cette ligation a lieu après avoir fait fondre les blocs d'agarose à 68°C

Isolement d’un mutant pif7 …………………………… 1) Introduction et rappels des lois de la génétique …………………………………… 2) Extraction d’ADN consiste à obtenir de l’ADN génomique ……………………… 3) Réaction en chaine par polymérase (PCR) ………………………………………… 4) Électrophorèses d’ADN sur gel d agarose …………………………………… 5) Résultats et interprétation …………………………………………………………. III. Conclusion ……………………………………………………. Annexe …………………………………………………………….. Sommaire annexes Annexe 1 : organigramme………………………………………………………………………………

enzymatique, afin de déterminer le rendement de la purification ; et par dosage des protéines à l'aide de la méthode de Bradford, pour calculer le facteur de la purification) et de manière qualitative (grâce a deux tests qualitatifs et une électrophorèse sur gel de polyacrylamide-SDS). Chromatographie sur colonne de DEAE sépharose Afin de purifier partiellement la β-galactosidase de l'extrait bactérien (extrait B), on réalise une chromatographie sur résine échangeuse d'ions

pour un organisme donné. Les isoformes présentent habituellement des paramètres cinétiques différents ou des propriétés de régulation différentes. Si on analyse une solution possédant une activité lactate déshydrogénase grâce à une électrophorèse en gel de polyacrylamide dans des conditions non dénaturantes, on peut observer jusqu’à cinq bandes. A gauche, l’extrait enzymatique provient d’un muscle : on obtient une bande qui migre légèrement vers la cathode. A droite, l’extrait

B-L’hybridation permet le repérage d’une séquence d’ADN Digestion par enzyme de restriction ADN génomique extrait Fragments d’ADN Électrophorèse Séparation par taille Hybridation avec sonde sb marquée Choix température * Transfert sur membrane Par capillarité Dénaturation par NaOH Fixation Lavage autoradiographie b-les autres types d’hybridation Hybridation de colonies bactériennes Puces à ADN L’ARN peut aussi être hybridé : northern blot L’hybridation sur puce pour