Gel de silice

éthanoïque et quelques grains de pierre ponce. - Chauffer à reflux. - Réaction : anhydride éthanoïque + alcool benzylique  acide éthanoïque + éthanoate de benzyle Document n°2 : Réalisation d’une CCM - Phase stationnaire: gel de silice - Éluant: mélange éthanoate d'éthyle/cyclohexane (1 / 3) - Révélation: UV - Solvant: cyclohexane Document n°3: Données concernant les espèces chimiques mises en jeu Anhydride éthanoïque M = 102 g.mol-1 d = 1,08 Teb = 139°C soluble

solution organique. Nous avons ensuite prélevé le surnageant de cette solution correspondant aux lipides en prenant en compte les différences de solubilité. Enfin nous avons fait migrer ce surnageant lors de deux chromatographies sur couche mince de silice afin de séparer et d’identifier les différents lipides. PRINCIPE 1/ Tout d’abord nous avons effectué l’extraction des différents constituants lipidiques du jaune d’œuf grâce à un solvant d’extraction. On prélève ainsi le jaune d’œuf lyophilisé

des constituants d’un mélange à l’aide d’un solvant mobile qui les entraîne à travers une phase fixe. La chromatographie permet de séparer et d’analyser les constituants d’un mélange en le faisant circuler à travers un milieu fixe inerte (alumine, silice…) à l’aide d’un solvant mobile (gaz, liquide) qui l’entraîne. Chaque constituant adopte une vitesse de migration qui lui est propre en fonction de sa solubilité dans la phase mobile et de son affinité pour la phase fixe qui tend à le retenir. Finalement

différence de migration en créant un champ de polarité au moyen de deux phases : la phase solide polaire (gel de silice) qui est le support de la migration, et la phase liquide plus ou moins apolaire qui est le vecteur de la migration. Dans ce cas on parle de chromatographie d’adsorption. Nous déposons donc les différents témoins et le surnageant liquide extrait du jaune d’œuf sur la plaque de silice, puis après migration et révélation par le bleu de Coomassie nous pouvons donc interpréter les résultats

de fractionnement fait appel à des forces d'adsorption* et des phénomènes de partage entre les solvants. Elle permet de séparer des petites molécules selon leur affinité pour deux phases : 1. la phase stationnaire : solide Le support :le gel de silice joue le rôle d’adsorbant . Il adsorbe les molécules de solutés (colorants) contenues dans la phase mobile, grâce à des forces de rétention par adsorption entre le support et les colorants. Cette adsorption empêche le déplacement des molécules de

Faire de même en utilisant le produit pur du laboratoire. On dispose aussi d’une solution de benzaldéhyde dans le cyclohexane. Sur la plaque chromatographique, tracer un trait à 1,5 cm du bord inférieur, et déposer, au niveau du trait, côté gel de silice à 1,5 cm de chaque bord, à l'aide de tubes capillaires, les micro-gouttes correspondant aux 3 produits. Sécher à l'aide du sèche cheveux, redéposer une goutte de produit, sécher et recommencer encore une fois. ATTENTION A NE PAS MELANGER LES

sur couche mince La chromatographie sur couche mince est un procédé permettant la séparation des divers composés chimiques d’un mélange. Elle repose sur un système à deux phases : * Phase fixe (ou stationnaire), absorbante, ici composée de gel de silice * Phase mobile, solvant que l’on va faire progresser par capillarité dans la phase fixe, entrainant les différents composés en présence. La séparation des composés repose sur leur affinité variable pour l’une ou l’autre des deux phases. Lors

1 éprouvette graduée de 10 mL 1 bécher haut de 250 mL 1 bécher de 50 mL 1 ampoule à décanter et son support 1 pipette graduée de 5 mL 2 erlenmeyers de 50 mL munis d'un bouchon 1 plaque de c.c.m (Attention ! Prendre des plaques recouvertes de gel de silice) 1 spatule 5 pipettes Pasteur cuve à chromato 1 petit flacon de limonène commercial 1 petit flacon de limonène obtenu au cours de l’hydrodistillation Arôme d’orange utilisé en patisserie Jus d’orange 1 petit flacon contenant du cyclohexane 1

une méthode de séparation physique qui utilise l’affinité des substances étudiées afin de provoquer leur séparation (Voet et Voet, 2005). Il est ici question de déposer quelques gouttes d’une matrice à séparer sur une phase stationnaire (couche de silice polaire) et de faire migrer une phase apolaire ou éluant (polaire) sur le chromatogramme afin d’entraîner les composants de la matrice en fonction de leur affinité avec l’éluant. L’éluant migre sur la phase stationnaire par capillarité et entraîne

chromatographie sur couche mince Solution T mise en solution dune capsule dans 1 litre de solution dHCl 0,2 mol/L , puis filtre. 1.1.Prparation des phases Phase stationnaire Identifier une plaque de gel de silice Marquer la ligne de dpt 1,5 cm du bord infrieur. Ractiver les plaques de gel de silice ltuve 110 C pendant 15 min. Phase mobile (sous la hotte) Mettre environ 8 mL de phase mobile dans une cuve et laisser saturer au moins 20 min. Composition de la phase mobile n butanol 4V acide actique