Gélose nutritive

potentialités élevées pour une utilisation en biotechnologie. L’étude de ces écosystèmes contribue très significative- ment à la compréhension des phénomènes à l ’origine de la vie sur terre.Matériel utilisés Boites de pétri contenant le milieu gélose nutritive Tubes à essayecontenet Micropipette de 1 ml Embouts bleus et jaunes stériles Pipettes Pasteur (râteau)

environnementales: Température • Optimum Thermique – Thermophiles : ≥ 40°C – Mésophiles : l’Homme) 20-40°C (++ pathogènes pour – Psychrophiles : ≤ 20°C – Cryophiles : ± 4°C (Listeria monocytogenes) Listeria monocytogenes Gélose au sang à +4°C Température • Température d’inactivation des bactéries: stérilisation – Ebullition : inactive sur endospores – Autoclavage (121°C, pression, ≥ 20 mn) – Pasteurisation (71.7°C, 15 sec) – UHT (>135°C, 2 à 5 sec) – Flammes (bec

sont des bactéries Gram+ sphériques ou ovoïdes formant des chaines et capables de se développer en présence d’azoture de sodium à 37°C pendant 48H d’incubation dans : * Un milieu liquide azide dextrose (nombre le plus probable) * Sur une gélose de SLANETZ (filtration sur membrane). Test présomptif : On distingue dans cette méthode d analyse trois étapes essentielles dont : * Le prélèvement : l’échantillon à analyser doit être prélevé dans des conditions stériles en évitant toute

des antiseptiques et désinfectants chimiquesN : Nombre VRB : Gélose lactose biliée au cristal violet et rouge neutreXLD : Xylose-Lysine-DésoxycholateUFC : Unité Formant ColonieMl : Millilitre Sab : SabouraudH : Heure RODAC: Replicate Organism and CountingG: Gramme Min : MinuteUI : Unité internationaleDGAT : Dénombrement des germes aérobies totauxDMLT : Dénombrement des moisissures et levures totauxTSA : Gélose tryptone sojaVRBG : Gélose lactose biliée au cristal violet et rouge neutreThio : ThioglycolateListe

Gélose pour dénombrement (PCA) DOMAINE D’UTILISATION La gélose glucosée à l’extrait de levure, appelée par les Anglo-Saxons “Plate Count Agar” ou PCA, est utilisée en bactériologie alimentaire pour le dénombrement des bactéries aérobies psychrotrophes, mésophiles dans le lait, les viandes, les produits à base de viande, les autres produits alimentaires, ainsi que pour l’analyse des produits pharmaceutiques, des produits cosmétiques et de leurs matières premières. HISTORIQUE La gélose pour dénombrement

GELOSE DRIGALSKI Milieu sélectif permettant l’isolement des bactéries Gram- non exigeantes. Il est utilisé pour l’isolement des germes urinaires et pour la coproculture. | | Composition Formule en g/L d'eau distillée et fonction: Peptone:Source de protéide, sels minéraux facteurs de croissance | 15 | Extrait de viande:Source de protéide, sels minéraux facteurs de croissance | 3 | Extrait de levure:Source de protéide, sels minéraux facteurs de croissance

problèmes à résoudre. Sur le protocole n°1, nous avons pu observer qu’il y avait des Antibiotiques Antagonistes : le ciprofloxacine, l’acide nalidixique et la gentamycine donnaient des halos plus importants lorsqu’ils étaient déposés côte à côte dans la gélose. Nous avons fait le choix de ne pas le préciser lors de la manipulation en classe entière, car nous voulions que les élèves le découvrent par eux-mêmes. Sur le protocole n°2, nous avons eu quelques soucis avec la méthode en milieu liquide. En effet

milieux les plus utilisés sont le milieu de Muller Kauffmann qui contient des sels biliaires, du tétrathionate et du vert brillant, ou le milieu de Leifson qui contient du sélénite de sodium. Après 24 heures, le contenu de ce milieu est repiqué sur gélose Hektoen. L'incubation de tous les milieux se fait à 37° C pendant 18 à 24 heures. Les milieux Hektoen ou SS doivent ensuite être observés avec attention et les colonies suspectes (tableau n° 1), 5 au moins, doivent être repiquées sur des milieux

milieu de CHAPMAN au mannitol .l’incubation se fait à à 37°C pendant 24 heures. Analyses bactériologiques: Incorporation en gélose nutritive : Cette méthode a pour but de déterminer les germes en général qui se trouvent dans l’eau destinée à la consommation humaine, ainsi on ensemence deux boites de pétri stériles par (1ml) de l’échantillon, puis on ajoute la gélose nutritive et on incube une boite à 22°C pendant 72 heures, et l’autre à 37°C pendant 48 heure. Normes Marocaines de qualité des eaux

sur gélose coulée dans des boites de pétris (la méthode d’isolement par épuisement de la semence cf. schémas 1). Page 1/5 Nous allons coupler cette technique d’isolement des bactéries l’utilisation de milieux de culture sélectif à des groupes de bactéries. Nous allons utiliser trois milieux sélectifs présentant des caractéristiques différentes et un milieu non sélectif qui nous permettra l’observation macroscopique de toutes les colonies.  Milieu non sélectif qui est une Gélose Nutritive Ordinaire