Gélose nutritive

5 mm  Grosses colonies : Colonies dont le diamètre est supérieur à 5 mm  Les colonies de type « envahissantes » (Proteus, Pseudomonas…) ne peuvent pas être mesurées véritablement. En effet, leurs contours ont souvent atteint les bords de la gélose ou, les colonies se superposent. Donc, on ne donne aucune taille. V La surface La surface d’une colonie bactérienne peut changer d’un repiquage à l’autre. Cependant c’est un critère important car relié à d’autres caractères dont parfois

Bactériologie Milieux de culture Gélose CLED (Cystine Lactose Electrolyte Déficient) * Usage : Utilisé dans l'étude des bactéries contenues dans l'urine. C’est un milieu non sélectif, de nombreuses bactéries, tant Gram + que Gram -, pourront se développer. L’absence d’électrolytes (pas de NaCl) limite le phénomène d’envahissement par les Proteus. (Surtout utilisé en coproculture) * Composition et préparation : * peptone : 4 g * extrait de viande : 3 g * peptone pepsique

Tout d’abord, on ensemence la flore coliforme totale sur une gélose VRBL que l’on incube à 30°C pendant 24heures. On ensemence pour chaque lait 1mL des dilutions de 10-1 à 10-3. On ensemence ensuite la flore coliforme thermo-tolérante sur une gélose VRBL que l’on incube à 44°C pendant 24 heures. Pour le lait 1 on ensemence 10-1 et 10-2, et pour le lait 2 uniquement 10-1. Après on ensemence la flore mésophile aérobie sur une gélose PCA que l’on incube à 30°C pendant 72 heures. Pour le lait 1

comparer ces deux techniques. Nous avons également réalisé la dernière partie du challenge test d’un savon liquide à J28. Observations microscopiques Nous réalisons une coloration de Gram pour les deux souches étudiés, à partir de la souche isolé sur gélose ordinaire. souche | J | forme | coque | taille, aspect | 1 µm, rond | gram | positif | souche | 10 | forme | bacille | taille, aspect | court, fin, droit | gram | négatif | Tests enzymatiques Pour la souche J, nous réalisons le test

Faire sécher les boîtes à l’étuve. -Les lamelles préalablement stérilisées avec de l’alcool emballées dans le papier aluminium et mises dans l’autoclave sont insérées dans la gélose avec minutie dans la zone stérile. -Enfin les souches bactériennes sont ensemencées avec prudence sur la surface de la gélose et de la lamelle on utilisant l’anse de platine. 3. Mise en évidence de la capacité des bactéries à dégrader certains composés de synthèse : 3.1. Biodégradation des

heures à 37°C en atmosphère ordinaire. 4. Réalisation des témoins inoculum  Réaliser une dilution en série de l'inoculum, de la dilution 10-1 à la dilution 10-4.  Étaler, sous forme de strie, les dilutions 100, 10-1, 10-2, 10-3 et 10-4 sur deux géloses PCA (Plate Count Agar) pour dénombrement. Les stries sont réalisées à l'anse calibrée de 10 L. Doubler les stries pour les dilutions cibles 10-3 et 10-4.  Incuber 24 heures à 37°C en atmosphère ordinaire. TSTL ; travaux pratiques en microbiologie

Gram - Ensemencement de milieux solides gélosés. TCS : ce milieu permet de distinguer les différentes souches bactérienne en présence au J2 on peut a partir de ce milieu réaliser les tests enzymatiques de la catalase et l’oxydase. Vérification de pureté et pigments possible. Chapman : milieu ayant une concentration en Na Cl forte on peut vérifier le caractère halotolérants des bactéries il y a aussi le caractère mannitol présent sur ce milieu Gélose au sang : Milieu enrichi spécifique qui permet

ensuite colorée avec le violet de cristal, l’iode, le décolorant puis la safranine. Résultats Interprétation Couleur rose Gram - Forme ovale Bacille Tableau 2. L’oxydase de la bactérie inconnue 1. Un frottis a été effectué sur la colonie en gélose puis déposé sur une bandelette. Résultat Interprétation Pas de couleur Négatif Tableau 3. La catalase de la bactérie inconnue 1. Une goutte de peroxyde d’hydrogène a été déposée sur une lame. Ensuite, nous avons effectué un frottis avec une

bactérie qui se trouve à la surface de notre peau. Tout d’abord, nous devions étamper notre pouce sans aucun lavage sur une gélose, ensuite nous refaisions la même chose mais après lavage à l’eau, suivit d’un lavage au savon et finalement après avoir introduit notre pouce à l’intérieur de notre bouche. Pour ce qui est des résultats de Sébastien, le pousse appliqué sur la gélose initialement était sans aucun doute le plus consistant en bactérie, nous avons pu dénombrer une colonie d’au moins 20 gros

Amp+ Amp- Amp+ Amp- 3. Scotcher les bords des boîtes. 4. De retour au lycée, incuber les boîtes dans l’étuve à 37 °C. Tube A’ Tube B’ Amp+ : gélose additionnée d’un antibiotique, l’ampicilline. Amp- : gélose sans ampicilline.