Tp Enzymologie Phosphatase Alcaline

ÉTUDE CINÉTIQUE DE LA PHOSPHATASE ALCALINE ET DÉTERMINATION DU pH OPTIMUM BUT: Connaître les caractéristiques de la phosphatase alcaline tels que la Vm, le Km et le pH optimum. Lors de ce T.P. On étudiera donc les propriétés phosphatase et alcaline de cette enzyme. Une phosphatase est une enzyme qui hydrolyse un monoester phosphorique et forme un phosphate et un alcool ou un phénol: R-O-PO32- + H2O → R-OH + HPO42- Pour connaître le Vm et le Km de cette enzyme, on a besoin

TP ENZYMOLOGIE ETUDE CINETIQUE DE LA PHOSPHATASE ALCALINE ET DETERMINATION DU PH OPTIMUM Introduction Les phosphatases sont des enzymes qui hydrolysent les monoesters phosphoriques. Ici, on étudiera les effets de l’enzyme sur le PNPP. La phosphatase alcaline hydrolyse le PNPP suivant la réaction suivante : PNPP + H2O PNP Cette réaction libère du PNP. Le PNPP est incolore, alors que le PNP est jaune en milieu alcalin, ce qui permet de le doser directement par spectrophotométrie à 410nm

BCH2008L Enzymologie et Métabolisme ___________________________________________________________________ ETUDE CINETIQUE ET DETERMINATION DU pH OPTIMUM DE LA PHOSPHATASE ALCALINE Les phosphatases ou phosphomonoestérases sont des enzymes qui hydrolysent les monoesters phosphoriques avec formation de phosphate minéral et d'un alcool ou d'un phénol, selon la réaction : R-O-PO32- + H2O  R-OH + HPO42- Méthodologie La manipulation permet l'étude de l'influence de plusieurs facteurs sur la réaction

BCH2008L Enzymologie et Métabolisme ___________________________________________________________________ Page | 1 ETUDE CINETIQUE DE LA PHOSPHATASE ALCALINE Les phosphatases ou phosphomonoestérases (EC 3.1.3.1) sont des enzymes qui hydrolysent les monoesters phosphoriques avec formation d’un ion phosphate et d'un alcool (ou d’un phénol), selon la réaction : R-O-PO3 2- + H2O  R-OH + HPO4 2- Méthodologie Le but du TP est d’étudier l’influence de la concentration de initiale substrat ([S]0)

UNIVERSITE DE LA REUNION Faculté des Sciences et Technologies Département de Biochimie et Biologie Moléculaire Année Universitaire 2011-2012 UE S34BC22 TP 1: L’ORTHONITROPHENOL oNP-OH TP 2: THERMODYNAMIQUE D’UNE REACTION ASPECTS QUALITATIFS TP 3: ETUDE CINETIQUE D’UNE ENZYME: LA PHOSPHATASE ALCALINE L’objectif des Travaux Pratiques de biochimie est :  d’initier un jeune public attiré par les Sciences de la Vie aux techniques les plus classiques actuellement utilisées dans les laboratoires

sucres | Glucose Hyperglycémie par voie orale (HPO) | Glucose urinaire Peptide C = peptide de connexion | Exploration des fonctions hépatiques et pancréatiques/Enzymologie | Amylase urinaire Alcool Amylase Bilirubine 5' Nucléotidase -GT = gamma glutamyl-transpeptidase | Lipase Phosphatases acides Phosphatases alcalines Lactate Deshydrogénase (LDH) Transaminases (ASAT, ALAT, TGO, TGP) | Les vitamines | Vitamine A1 = Rétinol Vitamine C = Acide ascorbique Vitamine B1 = Thiamine