Tp Séparation Par éléctrophorèse

I / Principe de la séparation p.1 1) Méthodes p.1 a – Préparation de l’extrait brut b- Chromatographie d’affinité et d’exclusion 2) Résultats et discussion p.5 a – Chromatographie d’affinité b- Chromatographie d’exclusion II / Etude des fractions purifiées p.7 1) Méthodes p.7 2) Résultats et discussion p.8 a – Détermination des concentrations en protéines b- Suivi de la purification III / Electrophorèse p.11 1) Méthodes p

 TP- Biologie Moléculaire PLATEFORME BIO CIME - nanotech dans les locaux du BCAi (Bâtiment des Composants Avancée de l'INP Grenoble) 3, PARVIS LOUIS NEEL BP 257 / 38016 GRENOBLE Cedex 1 PLAN du TP-TD Principe : Il est organisé autour de  SNAP, une protéine soluble de Dictyostelium discoideum qui a été étudiée en TD de bioinformatique. On veut faire l’expression du fragment cytoplasmique avec une étiquette His6 dans un vecteur pQE30. Diverses techniques

Purification du lysozymeBut :Le but de ce TP est de purifier un lysozyme, qui est une enzyme présente dans le blanc d’œuf. Pour cela, nous allons, dans un premier temps, séparer les constituants de notre mélange grâce à une chromatographie échangeuse d’ions, puis nous allons doser l’activité enzymatique du lysozyme par dosage spectrophotométrique. Enfin, nous allons réaliser un dosage de protéine grâce au réactif de Bradford et une gamme étalon. Principe  :Chromatographie

PPrraattiiqquueess TP 1. Séparation de l'alanine et de l'arginine sur résine échangeuse d'ions TP 2. Spécificité des actions enzymatiques : les glycosidases TP 3. Extraction de l'albumine d'un sérum par chromatographie d'affinité TP 4. Structure d’un dipeptide et mise en évidence d'une réaction de transamination par la glutamate oxaloacétate transaminase TP 5. Etude cinétique de la trypsine Préparation de vos TP Il est indispensable de bien préparer vos TP avant la séance afin

Microsoft Word - TP 1 .docx Biochimie expérimentale 1 : Compte rendus TP1 : Séparation de l’alanine et de l’arginine sur résine échangeuse d’ions BUT : Le but de ce TP est de séparer deux acides aminés, alanine et l’arginine, d’un mélange alanine-arginine par chromatographie échangeuse d’ions, de type cationique. On effectuera par la suite un dosage spectrophotométrique afin de quantifier la concentration d’alanine présent dans le mélange à l’aide d’une coloration à la ninhydrine et

d’hydrogène ( H2O2) composé toxique au fort pouvoir oxydant qui va être par la suite utilisé pour des réactions de réticulation au sein de la paroi ou dans la transduction de signaux. Réaction : OxO (COOH)2+O2 ====> CO2+H2O2 Dans la première partie de ce TP, nous allons d’abord mettre en évidence la présence du gène de cette enzyme chez le blé avec la réaction de PCR, en testant 4 méthodes d’extractions et lors de la seconde partie, nous utiliserons 2 méthodes différentes pour caractériser l’activité enzymatique

MOUVI Yao Armel & CHEBBAH Fella Yasmine Compte rendu TP Partie 1 Clonage du gène ESR1 dans le vecteur plasmidique pGFP pour obtenir la protéine fusion (GFP-ERα) I-But : Le but des toute ces séances de TP sont de rétablir via un vecteur d’expression, l’expression de la protéine Erα (récepteur des oestrogènes) dans la lignée cellulaire de carcinome mammaire (MD1-MB-231) Le but plus particulièrement des deux premières séances de TP est de cloner le gène ESR1 dans un plasmide pour faire une

EXTRACTION DE L'ALBUMINE PAR CHROMATOGRAPHIE D'AFFINITE BUT Le but de ce tp est de séparer une protéine précise, l’albumine d’un mélange de protéines par chromatographie d’affinité. PRINCIPES Purification de l'abumine par chromatographie d'adsorption : Les chromatographies d'adsorption sont des méthodes de séparation où la molécule d'intérêt d'un mélange complexe (albumine dans notre cas) est isolée des autres constituants parce qu'elle se lie spécifiquement à la résine ou matrice

Compte rendu de TP Purification de lysozyme I/ But Le but de ce TP est la purification de lysozyme, une enzyme qui se localise dans le blanc d’œuf. Pour ce faire, nous allons procéder en trois grandes étapes : 1) Dans un premier temps, nous utiliserons la chromatographie d’échanges d’ions pour séparer les constituants de notre mélange. 2) Dans un deuxième temps, nous

à conduire des activités d’analyses physico-chimiques et d’élaboration de matériaux. La formation dispensée concerne différents aspects scientifiques et technologiques : transfert fluide-solide, échanges thermiques et énergétiques, techniques de séparation et de purification, régulation et contrôle des procédés. Les ingénieurs peuvent au sein de l’industrie chimique et para-chimique apporter leur compétence dans l’amélioration et la maintenance des procédés assurant la compétitivité liée à la qualité