Cinétique Enzymatique Hétérogène

Responsables : M. BEAUVOIT BERTRAND   Contenu : Programme : Cours et TD -Définition et mise en place des principales voies métaboliques des sucres, acides gras et acides aminés -Bases d'enzymologie : cinétique enzymatique Travaux pratiques - Détermination des caractéristiques cinétiques (Vm, Km, kcat) d'une enzyme Contrôle des connaissances :  Coefficient : 0.2 Contrôle continu   Coefficient : 0.2 Examen TP   Coefficient : 0.6 Examen   Microbiologie (TL4VC02U) Crédits ECTS :

TECHNOLOGIES BIOCHIMIQUES ET BIOLOGIQUES TRAVAUX PRATIQUES SUJET 21 Durée : 7 heures Coefficient : 9 BIOCHIMIE (8 points) Durée : 3 heures DETERMINATION DES CONSTANTES CINETIQUES KM et Vmax D’UNE ENZYME L’enzyme étudiée est la phosphatase alcaline. On utilise la cinétique d’hydrolyse du PNPP (paranitrophényl phosphate) à 30°C et à pH = 9,8. PNPP + H2O ----------------- PNP + Phosphate Le PNP (paranitrophénol) jaune en milieu alcalin est dosé par photométrie d’absorption

DEPARETEMENT DE BIOLOGIE TRAVAUX DIRIGES DE BIOCHIMIE SV(4) CINETIQUE ENZYMATIQUE 1) Que devient la valeur de la vitesse d’une réaction quand [S]= Km, 2Km, 4Km et nKm? 2) 2. Si la valeur de la vitesse maximale d’une réaction étant de 100 µmol/min et Km avec une valeur de 2mM, quelle sera la valeur de la vitesse de la réaction quand [S]= 2µM et 2M ? en déduire la zone qui délimitera les différents types d’ordre cinétique enzymatique. 3) L’étude de l’activité de la trypsine sur la carbobenzoxylysine

Cinétique enzymatique Mesure de l’activité enzymatiqaue Dr AKSAS 1 Cinétique enzymatique La R enzymatique peut être subdivisée en 3 étapes: 1. Phase préstationnaire; 2. Phase stationnaire; 3. Phase post-stationnaire. 2 Cinétique Michaelienne Représentons les vitesses initiales de R en fonction des concentrations du substrats 3 Cinétique Michaelienne  Les vitesses mesurées croissent en fonction des concentrations du substrat.  Mais cette relation n’est pas linéaire :

(enzyme qui brise les polysaccharides). Cette enzyme permet la digestion des sucres lents, en transformant l’amidon et le glycogène en d’autres substances complexes comme le maltose. Au cours de ce TP, nous allons étudier les différents paramètres cinétique de cette enzyme en mesurant l’absorbance d’échantillon à diverses températures, concentrations ou en présence d’inhibiteur. MATERIEL ET METHODES Matériel : Glace pillée Pilon Centrifugeuse Réactifs et produit : Tampon Acétate de

Dans certain cas, les réactions peuvent être tellement lentes que l’on doit avoir recours à un catalyseur pour les accélérer et ainsi, pouvoir les mesurer. On donne le nom de « réaction enzymatique » à ces réactions, dont le processus est accéléré par une enzyme. Or, cette expérience enzymologique étudie l’effet que peut avoir la concentration d’enzyme sur la vitesse de la réaction. De plus, on tente d’élucider l’effet du pH sur la réaction ainsi que l’effet de la concentration du substrat. Pour

COMPLEXE ENZYME – SUBSTRAT D'après Jacques Barrère, Lycée Paul-Louis Courier, Tours On sait que : • Les enzymes sont des catalyseurs d'une très grande efficacité. • Au cours d’une réaction enzymatique, le substrat se transforme progressivement (phénomène progressif nécessitant 3 à 5 minutes) en présence de l’enzyme qui reste inchangée. • Il y a spécificité entre enzyme et substrat. Il y a spécificité de la réaction catalysée par une enzyme donnée. • Plus il y a de substrat

Etude cinétique de la trypsine I. But Le but de ce TP est de déterminer les paramètres cinétiques de la trypsine : * Le KM qui correspond à la constante de Michaelis ; * La Vmax qui correspond à la vitesse maximale et ; * v, la vitesse initiale. II. Principe La trypsine est une enzyme digestive du suc pancréatique qui a pour but de digérer les protéines. La trypsine est une endoprotéase qui hydrolyse les liaisons peptidiques dans lesquelles un acide aminé basique, la

Compte rendu Cinétique enzymatique Une enzyme est un catalyseur biologique de nature protéique, ayant pour but d'accélérer une réaction chimique, comme la peroxydase présente dans le navet, elle active la réaction de transformation du peroxyde d'hydrogène (=eau oxygénée : H2O2) en eau et dioxygène. 2H2O2→ 2H2O+O2 SubstratPéroxydaseProduits = Enzyme Un substrat est une molécule transformée en produit au cours d'une réaction chimique. Le produit est une molécule résultant d'une réaction chimique

Exercices - Cinétique enzymatique 1. Que devient la valeur de v /Vmax quand [S ] = 4 K m ? 2. Si Vmax = 100 μmol / ml / s et Km = 2mM, quelle est la vitesse de la réaction quand [S]=20 mM ? 3. Dans une réaction à cinétique de type Michaelis-Menten, k1 = 7 X 10 7 M −1 s −1 , k −1 = 1 X 103 s −1 , et k 2 = 2 X 10 4 s −1. Quelles sont les valeurs de Ks et de Km? La fixation du substrat atteint-elle l’équilibre ou plutôt l’état stationnaire? 4. Les résultats suivants sont obtenus au cours d’une