Incube

à l’insert. Tester la digestion avec 0, 1 ou 2 enzymes compatibles dans le même tampon. Volumes (L) ech1 ech2 ech3 ech4 Tampon IV 2 2 2 2 DNA x x x x BamHI 0 1 0 1 KpnI 0 0 1 1 H2O compléter à 20 l …………………………… Incuber 2h à 37°C. Conserver les échantillons à –20°C et/ou déposer sur gel d’agarose. Migration digestion ER et PCR sur gel d’agarose et analyse Préparer les gels d’agarose 1% nécessaires (2 puits/étudiant : PCR ; 4 puits/étudiant ER + standards)

3.1.2 Préparation de l’autolysat Parallèlement sur un deuxième homogénat obtenu dans les mêmes conditions, réaliser les opérations suivantes: - Transvaser la totalité du volume VH dans une fiole conique. - Boucher au coton cardé. - Incuber pendant 24 h au bain thermostaté à 40 °C. - Centrifuger 15 min à 4000 tours I min. - Récupérer le surnagent (autolysat) et noter le volume VA obtenu. - Répartir en Eppendorf de I mL. - Conserver une fraction dans la glace pour la détermination

200 µL de suspension de bactéries compétentes. Penser à identifier les tubes, par exemple A’ et B’. 2. Incuber au moins 20 min dans la glace. 3. Réaliser un choc thermique en plongeant les tubes pendant 45 s dans un bain-marie à 42 °C. 4. Dans chaque tube, ajouter 400 µL de milieu de culture LB stérile (milieu nécessaire pour que les bactéries se multiplient) et incuber au moins 15 min à 37 °C. 5. Centrifuger les tubes 2 min à 4000 rpm, puis enlever 400 µL de surnageant et remettre

tube seulement pour les réactions sans indications. Ensuite, il faut remplir le tube et la cupule pour les réactions encadrées et finalement remplir le tube et ajouter ensuite de l’huile minérale dans la cupule pour les réactions soulignées. Faire incuber de 18 à 24h et rajouter ensuite certains réactifs dans les puits selon le besoin. Voici les réactifs ajoutés après incubation pour l’API 20 E : TDA : réactif TDA (FeCl3 10%) ⟶ une goutte IND : réactif IND

cauchemar" de Fussli, est une oeuvre romantique. I. ANALYSE DU TABLEAU : Ce tableau représente un cauchemar, en effet nous sommes face à une femme endormie dans une position très courbée qui revèle un trouble du sommeil évident. Sur son ventre un incube qui semble regarder en notre direction. L'intérieur est contemporain et à la mode, avec une petite table au premier plan sur laquelle on trouve les débris d'un miroir, une fiole et un livre. La salle est décorée avec des rideaux rouges en velours

homogénéise par des mouvements circulaires et on laisse refroidir les boites sur une surface plane à température ambiante. Ensuite en coule à nouveau environ 5 ml du même milieu afin de garantir l’aéro-anaérobie facultative. On laisse refroidir puis on incube à 30°C pendant 24 heures. Rapport de stage ouvrier au sein de laboratoire de l’ONSSA Agadir Faculté de sciences et techniques de Fès 11 B.2) Résultats Après 24 heures d’incubation les colonies dénombrées sont en rouge ou violette ayant un diamètre

centrifugeuse - tubes à centrifuger (2/binôme) - flacons pour la congélation - bicarbonate de sodium à 0,1M (préparation : 8,4 g dans 1L eau distillée) 2 - Mode opératoire - Suspendre 10g de levure de boulangerie dans 40 ml de bicarbonate de sodium à 0,1M - Incuber à 35-40°C pendant 24H - Centrifuger à 5000 tr/min pendant 5 min - Après centrifugation, récupérer le surnageant contenant les molécules solubles entre autres l’invertase. - Jeter le culot formé de débris cellulaire - Noter le volume total de surnageant

cellulaire. En général, 100 à 200 μl sont inoculés dans chacun des puits d’une plaque de culture de 24 puits, 1 ml dans un tube Leighton, et 1 à 2 ml dans un flacon de 25 cm2 ; Chapitre 2.10.11. — Grippe porcine Manuel terrestre de l’OIE 2005 1221 iv) Incuber les cultures cellulaires inoculées pendant 1 à 2 h à 37°C. Quand les récipients de culture cellulaire sont ouverts à l’environnement, comme les plaques de culture, l’incubation doit être faite dans un incubateur humidifié, en présence de 5 % de

lames et on laisse incuber toute une nuit à 4°C. Le deuxième jour, on rince les lames avec le PBS-Tween à 0.01% puis on procède à la dilution des anticorps secondaires. On utilise: - un anticorps d’âne anti-lapin DyLight 594 (711-515-152, Jackson Immunoresearch) - un anticorps d’âne anti-poulet DyLight 488 (703-545-155, Jackson Immunoresearch) Ils seront dilués au 1/2000 dans la solution de PBS-BSA 1%. On dépose à nouveau 100 µL de ces solutions puis le tout est laissé incuber 45 minutes à température

boîte de Mueller Hinton à l’aide d’un écouvillon stérile. Puis on dépose six disques antibiotiques (Kanamycine, Pénicilline, acide fusidique, amoxicilline, nitrofurantoïne ou furadantine et érythromycine) sur le milieu gélosé. On laisse la boîte incuber pendant 24 heures. e) Résultats Schéma de la boîte de Mueller Hinton. Antibiotique Diamètre en mm Observation Conclusion Acide fusidique 0 < 3mm souche résistante R Kanamycine 24 > 17mm souche sensible S Pénicilline 10 Entre