Plasmide

chromosomique à une bactérie receveuse. 3.3. La conjugaison : 3.3.1. Mécanisme de la conjugaison : 3.3.1.1. Chez les bactéries Gram - : Les bactéries donneuses possèdent un plasmide particulier appelé facteur F, ou épisome. Ce plasmide porte les gènes nécessaires à la synthèse des pili et au transfert de l’ADN. Ce plasmide peut s’intégrer au sein du chromosome de la bactérie réceptrice au niveau de séquences d’insertion par recombinaison homologue. On appelle « mâle », les bactéries donneuses qui

obtention du premier ADN recombinant grâce aux enzymes de restriction (une chimère non fonctionnelle de deux virus simien SV40). Pour ces travaux il reçut le prix Nobel de chimie en 1980. • 1973: Identification du plasmide Ti dans la bactérie Agrobacterium tumefaciens. Ce plasmide permet d'accueillir le gène porteur d'un caractère recherché, qu'il est en mesure d'introduire dans le génome d'une plante. S.Cohen et H.Boyer introduisent des gènes d’un amphibien dans une bactérie (E.coli) et obtiennent

soit l’introduction d’un gène étranger dans une bactérie. Le gène qui est isolé à partir d’une cellule humaine saine est le gène permettant la synthèse de l’interleukine. Ce gène est inséré dans un plasmide bactérien, qui n’est rien d’autre que un mini chromosome d’une bactérie appelée E.coli. Le plasmide est ensuite intégrer dans une bactérie que l’on fait se multiplier. Toutes les bactéries obtenues parviennent alors à fabriquer de l’interleukine. Les documents présentent donc l’exemple d’une transgenèse

La conjugaison : transfert direct de matériel génétique entre 2 cellules bactériennes temporairement liées. - Un plasmide : petite molécules d’ADN circulaire capable de se répliquer de façon autonome. - Un épisome : élément génétique pouvant exister sous forme de plasmide ou en tant que segment du chromosome bactérien. - Facteur F : facteur de fertilité extra chromosomique = plasmide F -> responsable de la production de pilis sexuels. Regroupement de l’ADN provenant de 2 individus distincts : - la

2. On souhaite transformer une bactérie ou une levure en lui apportant un plasmide (petit ADN circulaire ayant une origine de réplication autonome) luimême porteur d’un transgène. Il est utile que de tels plasmides soient porteurs d’un gène de sélection positive, par exemple un gène de résistance à un antibiotique comme la kanamycine ou la néomycine, ce qui permettra de récupérer les seules cellules ayant acquis le plasmide sur un milieu de culture additionné de l’antibiotique de sélection. Remarque

Partie 1 : chapitre 1 : La reproduction conforme d’une cellule = La MITOSE L’interphase : Procaryote = sans noyau et Eucaryote = avec noyau L’ADN se présente sous deux formes : * Forme filamenteuse * Forme en anneau = plasmide La cellule doit conserver la même taille, elle augmente : * Le volume cytoplasmique * Le réseau du réticulum endoplasmique * Les ribosomes et mitochondries * Hyaloplasme (gel translucide) Pour cela, elle augmente la synthèse de molécules organiques

etc.) * Concentration de l'ADN par précipitation à l'alcool Différentes variantes sont employées, suivant que l'on cherche à extraire de l'ADN génomique (issu du ou des chromosomes des cellules analysées) ou de l'ADN plasmidique (provenant de plasmides portés le plus souvent par des cellules bactériennes comme Escherichia coli). Il existe aujourd'hui des kits commerciaux permettant de réaliser rapidement ces extractions à l'aide de réactifs prêts à l'emploi. Le lavage : Une première étape consiste

vie de la cellule. La seconde molécule est le plasmide. C'est un ADN qui n'est pas vital mais qui permet à la bactérie de mieux s'adapter à son environnement. Il peut avoir un échange de plasmide entre 2 cellules. Une des cellule (la bactérie donneuse) fabrique un pont cytoplasmique qui permet le passage d'une copie du plasmide. Cette copie est transféré à la bactérie receveuse. La bactérie receveuse peut alors utiliser cette copie de plasmide, elle pourra alors elle aussi s'adapter plus facilement

recombinantes, on additionne l’ARN messager, responsable de la synthèse des trois OVAX dans trois plasmides, contenant une résistance à un antibiotique, mais aussi un gène exprimant une galactosidase. Ces trois transcrits de l’OVAX ont été obtenus à partir des transcrits du magnum de la poule, et ont été insérés dans le gène plasmidique codant la galactosidase, ce qui détruit l’activité galactosidase. Chaque plasmide est mis en contact avec les bactéries dont la paroi a été perméabilisée et qui, en utilisant

pyrale. Celle ci a été extraite d'une bactérie Bacillus thuringiensis dont on a extrait le gène codant la toxine Cry1ab permettant au mais de produire son insecticide . Ici la transgenèse consiste à introduire le gène codant la toxine Cry1aB via le plasmide de la bactérie contenant le gene d'intert dans le mais ? Le gène d’intérêt va donc se multiplier et donner un nouvel individu dont toutes les cellules posséderont le gène Cry1Ab. Le mais BT dénommé MON810 est la variété génétiquement modifiée la