Transformation Bactérienne

et nous déterminerons la concentration en levures d’une suspension. Enfin, dans un troisième temps, nous utiliserons différents tests biochimiques tel que la coloration de GRAM, la recherche d’activité catalase/oxydase, la recherche d’endospores bactériennes ou encore la détermination du type respiratoire, afin d’identifier les microorganismes présents sur des aliments contaminés. Pendant toute la durée de ce TP nous travailleront en condition d’asepsie. I- Matériel et méthodes 1) Fabrication

lactamase; Transposon Tn9 et Tn10 : transposons composites portant respectivement les gènes de résistance au chloramphénicol et aux tétracyclines. e)- Phage Mu ( pour mutateur) C’est un phage tempéré qui peut s’intégrer dans le génome bactérien pour former un prophage. Son intégration est une transposition de type réplicatif qui implique une partie de son génome telles que les deux extrémités att L et att R et deux gènes codant pour une transposase (pA) et une protéine activatrice de

clonage. Introduction Le travail réalisé lors de ce TP aura pour but la réalisation d'un clonage, c'est à dire l'insertion d'un fragment d'ADN contenu dans un vecteur initial dans un autre vecteur puis la transformation de ce plasmide recombiné dans les bactéries E-Coli. La transformation consiste à introduire un plasmide par choc thermique, électroporation ... dans une bactérie afin d'obtenir des clones de bactéries recombinantes qui seront par la suite analysés. Ainsi les bactéries transformées

Résumé La méthylation est un mécanisme de résistance développé par les microorganismes car les composés arséniés méthylés sont beaucoup moins toxiques que les formes d’arsenic inorganiques. Différents micro-organismes bactériens et fongiques sont capables de méthyler l’arsenic inorganique présent dans le sol. La voie de méthylation des bactéries et des champignons est différente. La biométhylation par les bactéries aura comme produit final le diméthylarsine (DMA) qui est un composé stable

1970 1973 1975 1975-77 1981-83 1985 1990 Mendel propose le concept du gène et de la transmission héréditaire des caractères génétiques. Isolement de l'ADN pour la première fois par Friedrich Miescher. Griffith découvre le principe de la transformation bactérienne. Avery, McLeod et McCarty démontrent que l'ADN est porteur du message génétique. Hershey et Chase confirment les travaux d'Avery et convainquent la communauté scientifique. Watson et Crick proposent le modèle de la double hélice pour l'ADN

contenant des bactéries ayant déjà subit la transformation). Les différentes étapes de l’expérience : a) Lyse des cellules bactériennes. b) Déproteinisation c)Enlèvement de L’ARN: traitement Rnase d) Précipitation de l’ADN But : ADN une fois extracté, on peut l’amplifier (PCR) , le doser , le séquencer ou le cloner... La démarche de l’éxpérience: Onfait une mini-préparation Classique . C’est une méthode de lyse alcaline. • Prendre de la culture bactérienne (déjà préparée) 2 à 5 ml et centrifuguer

S1 Pr G. Arlet Bactérie à Gram positif Acides téchoiques Bactérie à Gram négatif LPS Membrane externe Porine peptidoglycane espace périplasmique Membrane cytoplasmique Cours IFSI 2010 S1 Pr G. Arlet Autres composants de la paroi bactérienne Membrane externe (Gram -) : lipopolysaccharide (LPS), endotoxine, antigène somatique O Membrane interne (Gram -) ou cytoplasmique (Gram +) : barrière osmotique métabolisme énergétique. Capsule (inconstante) : polysaccharidique, virulence, (opsonisation)

Ce serait une molécule trop simple pour être le support de l’information génétique. Les protéines joueraient ce rôle. • 1952 : expérience de marquage sélectif des protéines et de l’ADN à l’ADN est le support de l’IG. Point Leçon : Transformation bactérienne = des bactéries dépourvues d’un caractère héréditaire peuvent l’acquérir au seul contact d’ADN purifié issu de bactéries de même espèce possédant, elles , ce caractère. L’ADN = support chimique de gènes. Exercice 1 page 144 : 2) Lors

Diapositive 1Nutrition et croissance microbienne La connaissance de la croissance bactérienne est d'une importance capitale tant au point de vue de la recherche fondamentale (connaissance les lois de la génétique moléculaire) que de la recherche appliquée (biotechnologie : production des médicaments, des produits alimentaires). La nutrition des bactéries fait intervenir deux types de substances : les substances élémentaires (les matériaux de base de constitution de la cellule) et les substances

Figure 1 : génome du phage lamda. Deux parties sont individualisées dans le phage lamba: - La tête du virus: elle renferme l’ADN viral. - La queue du virus: elle renferme des protéines. Elle permet la fixation du virus sur la cellule-hôte bactérienne. Le génome du phage lambda peut être divisé en: - Parties essentielles comprenant: - les gènes codant pour les protéines situées dans la tête et les protéines situées dans la queue du virus. - Les sites cos. - Le site de réplication de l’ADN