Transformation Bactérienne

sera alors sélectionnée et multipliée afin d’obtenir une grande quantité du plasmide d’intérêt. Cloner un gène consiste donc à l’insérer dans un plasmide. Un clone sera le transformant bactérien qui contient ce plasmide particulier. Dans ce cas on parle de clone car tous les individus de la colonie bactérienne sont génétiquement identiques. Le clonage moléculaire est donc différent du clonage reproductif (créer un individu génétiquement identique à un autre mais d'un âge différent) ou du clonage

avec le transfert d'ADN extrachromosomique (plasmidique) (figure 4). La transformation est le transfert passif d'ADN d'une bactérie donatrice à une bactérie réceptrice, dite en état de compétence. Le transfert, qui est partiel et limité à quelques espèces bactériennes, entraîne l'acquisition par la bactérie réceptrice de nouveaux caractères génétiques stables et transmissibles. La transduction est le tranfert d'ADN bactérien par l'intermédiaire de bactériophages (ou phages). Ceux-ci sont des virus

recombinant, plasmide, pBluescript, électrophorèse, transformation, LacZ, bactérie, phage lambda. Résumé : L’ADN peut faire l’objet de multiples travaux. Ici notre objectif est de cloner des morceaux de l’ADN du phage lambda dans le vecteur (plasmide) pBluescript. Pour se faire nous aurons recours à différentes techniques comme la digestion enzymatique (de l’ADN du phage ainsi que du plasmide), l’électrophorèse sur gel d’agarose, la transformation (par choc thermique) pour l’introduction des plasmides

cellule  par  exocytose,  c’est‐à‐dire  fusion  de  la  membrane  plasmique  avec  celle  des  grains.   Le  réticulum  endoplasmique  et  l’appareil  de  Golgi  ne  se  contentent  pas  de  transporter  la  protéine synthétisée mais réalisent des transformations chimiques, notamment en y ajoutant  des sucres.  Documents élèves – Génétique moléculaire  Documents élèves – Génétique moléculaire  E. La synthèse des protéines chez les cellules procaryotes  III. L’activité génique  La transcription

souches bactériennes se produit. Nous utilisons une souche donneuse d’E. coli qui dans son plasmide (pKY70GIN) contient le gène d’interêt (GUS-intron), une souche receveuse d’A. tumefaciens et une troisième souche « helper » d’E. coli. Celle-ci contient les éléments nécessaires à la conjugaison entre la souche receveuse et donneuse. La quatrième souche de bacteries qui posséde déjà le plasmide pKY70GIN est utilisée comme un témoin positif. Après incubation des trois souches bacteriennes nous effectuons

Chapitre 10 Fabrication des cultures et ferments Les cultures bactériennes, appelées ferments, sont utilisées dans la fabrication des yaourts, du Kéfir et d’autres produits laitiers fermentés, ainsi que dans la fabrication du beurre et du fromage. On ajoute le levain au produit et on le laisse s’y développer dans des conditions contrôlées. Au cours de la fermentation qui en résulte, les bactéries produisent des substances qui donnent au produit de culture ses caractéristiques distinctives, telles

composants peuvent varier d’une souche à l’autre, ce qui conduit à établir 3 classes de plasmides selon la nature des opines : Les plasmides à octopine Les plasmides à agropine Les plasmides à nopaline La synthèse d’opine est lié à la transformation génétique de la plante. b. Les gènes vir Les gènes vir situés sur le plasmide en dehors de la région de l’ADN-t sont indispensables au transfert de l’ADN-t. Le gène vir A : Vir A code pour la synthèse d’un

chromosomes jouent un rôle prépondérant dans la transmission des caractères. (Le modèle de séparation des chromosomes supporte tout à fait la théorie de Mendel) B : Quelques expériences historiques 1) Expériences de Griffith (1928) : la transformation bactérienne * Présentation du matériel d’étude * Griffith 1936, anglais Schéma d’un procaryote Avantages : cycle rapide de reproduction, mise en culture, gain d’espace. 2 souches de Pneumocoques (streptocoques) : *

Seules les mutations qui modifient le produit d’un gène ou son expression sont facilement détectables. http://www.arnobio2.com Arnaud Delahaye 2.2.1. Mutants morphologiques : Le caractère modifié concerne la morphologie de la cellule bactérienne ou de la colonie. Le caractère est facilement détectable par un examen macroscopique de colonie isolée ou par examen microscopique des cellules. 2.2.2. Mutants nutritionnels : Le caractère modifié concerne un besoin nutritionnel ou un caractère

travaux s’étalant de 1928 à 1952 vont permettre d’associer définitivement l’ADN à la notion d’information génétique. Mais pour mieux comprendre ces expériences il faut noter au préalable une possibilité qui existe chez les bactéries : la conjugaison bactérienne. Les expériences de Griffith Elles étaient débutées par une bactérie pathogène, un pneumocoque, agent de la pneumonie chez l'homme .La virulence de ces bactéries représente un caractère phénotypique, un autre en est l'aspect des colonies se développant