B Galactosidase

La séquence de ce fragment a décelé une phase ouverte de lecture de 741 nucléotides qui débute à partir du site EcoR1 et correspondant à une protéine de poids moléculaire de 27,5 kd. L’antisérum dirigé contre la protéine de fusion ( - galactosidase reconnaît une protéine de 40 kd, sur des extraits d’antigènes d’oocystes sporulés et non sporulés d’E.stiedae, et sur des oocystes sporulés d’E. magna et d’E.intestinalis. Une protéine de plus haut poids moléculaire (45 kd) est détectée chez

aminoacides Titrage protométrique de l'histidine Réalisation d'une solution tampon 4 5 Séparation de molécules par chromatographie d'exclusion sur colonne 6-9 Cinétique enzymatique Bases de cinétique enzymatique Etude de la β Galactosidase 10 – 11 11 - 13 Modèles moléculaires 14 – 17 Annexes à détacher et à inclure ans le compte rendu : Tableau cinétique enzymatique Tableau chromatographie d’exclusion -1- TP Biochimie LV 232 – Année 2009 - 2010 ANNEXE (à

l'ADN et l'ARN et enfin nous résumerons comment l'information génétique est transportée du noyau au cytoplasme. Activité 1: Grâce au logicielle ANAGENE, nous avons comparé des allèles sanguins de groupes différents (A et B). On remarque qu'une substitution s’opère dans le brin B par rapport au brin A : -Niveau 523: Le nucléotide Guanine remplace le nucléotide à Cytosine -Niveau 700: Le nucléotide Adénine remplace le nucléotide à Guanine -Niveau 793: Le nucléotide Adénine remplace le nucléotide à

indicateur coloré. Le BCP est jaune à pH acide et violet à pH neutre et alcalin (basique). Remarque : les bactéries lactose + doivent produire obligatoirement une perméase pour faire pénétrer le lactose à l’intérieur de la bactérie et une beta-galactosidase pour dégrader le lactose en glucose et galactose. Ces deux sucres simples peuvent être ensuite transformés par fermentation en acide lactique. Si on utilise le milieu BCP et si après ensemencement et incubation on observe un jaunissement autour

..................................................................................................... 4 a. Lactose.................................................................................................................................... 5 b. Maltose ................................................................................................................................... 5 2.1.2. Diholosides non réducteurs.........................................................................

sont sécrétées dans le milieu externe, par exemple, celles permettant la dégradation de grosses molécules ( amylase, caséinase). - soit des endoenzymes qui sont en solution dans le cytoplasme et participent au métabolisme de la cellule ( β-galactosidase, enzymes de la respiration ou de la glycolyse). 2) le métabolisme protéique et azoté : Les protéines sont des macromolécules constitués à partir d'a.aminés réunis entre eux par des liaisons peptidiques. Les microorganismes protéolytiques

       TD  1  -­‐  ENZYMOLOGIE  -­‐  Cinétique     Exercice  1  :  Relation  entre  Δ G’°  et  constante  d’équilibre  K’eq   Soit  5  réactions  de  type    A  ⇔  B   Calculer  les  proportions  de  A  et  B  à  l’équilibre,  sachant  que  les  variations  d’enthalpie  libre  standard  de  ces  5   -­‐1 réactions  sont  respectivement  de  0/1/5/10  et  20  kJ.mol .       on  donne

d’expression (séquences d’ADN signaux qui gouvernent la transcription et la traduction de la séquence par la ¢ hôte)  Les ¢ hôtes (B*, levures, ¢ Vg*, ¢ A*)  La technologie de l’ADN recombinant permet de produire des formes variantes de protéines naturelles. On parle du génie de protéines II- SYSTEMES D’EXPRESSION BACTERIEN  Les 1ers systèmes d’expression de protéines→ B* comme ¢ hôte.  E. coli permet de produire des protéines rapidement et à faible cout  Caractéristiques des systèmes bactériens

et d’un individu intolérant au lactose (b). Les points noirs correspondent aux particules d’or. Document 3 : Rôle de la flore intestinale Nos intestins contiennent une grande variété de bactéries intervenant dans le processus de la digestion que l’on regroupe sous le nom de flore intestinale. Comparaison de la concentration bactérienne du jéjunum et du colon. Quelques réactions réalisées par des bactéries de la flore intestinale. La bêta galactosidase est une enzyme sécrétée par les bactéries

une cire très rigide -interdit de les mettres dans la boite de petri Lohenstein Jensen : solide en tube pour myco DCL : désoxycholate citrate lactose - milieu selectif permet d’isoler les BGN - source de carbone : Lactose (ONPG test de b galactosidase) - indicateur de pH : rouge neutre -inhibiteur : désoxycholate de sodium inhibe la poussé de CGP Oxydase : Oydase + (coloration violette ex : pseudomonas) Chapman : - milieu solide sélectif POUR CGP - isoler les staphylocoques Source