B Galactosidase

on mute ces gènes cdc ( inactifs), le cycle cellulaire s’arrête à un point spécifique.  Ces mutants cdc sont souvent thermosensibles. Exemple : mutation du gène cdc9 (indispensable à la réplication). A- Condition permissive : replication OK. B- Condition non-permissive : CHECKPOINT intra-S  pas de reprise (défaut permanent)  mort. RÉPONSE À UNE LÉSION DU DNA Les protéines impliquées dans cette réponse ont souvent un rôle central dans les CANCERS. CHECKPOINT G1-S   STRESS

l’expression Poly A - Processing de l’ARNm • gène rapporteur • gène d’expression - Protéine - RNAi Gènes rapporteurs Organisation Promoteur séquences régulatrices d’intérêt Rapporteur pA • • • • • Gène LacZ (E.coli): β−galactosidase CAT: gène de Chloramphenicol acetyltransferase (E.coli.) Gène de luciferase (insecte) GFP: Green fluorecence protein gene (méduse) PLAP: gène de la phosphatase alcaline placentaire (mammifère) Gènes d’expression Ciblage ou surexpression d’une

fragments d’ADN obtenus après digestion sera modifiée et décelable après électrophorèse des fragments d’ADN (sur gel d’agarose ou gel de polyacrylamide). A titre d’exemple, la mutation ponctuelle (GAGàGTG) sur le sixième codon du premier exon du gène b de la globine humaine entraîne l’apparition d’une hémoglobine anormale appelée hémoglobine S (mutation ponctuelle d’un acide aminé: GluàVal). Cette anomalie est répandue dans le monde entier. Elle est responsable à l’état homozygote d’une pathologie

rien : les blastomères portent une information. Les blastomères portent un déterminant comme « myoplasme » : faire du muscle. Cela est localisé. Cela a conduit à des notions de lignage : destin rigide et déterminé dépendant d’information localisé. b) Annélides et mollusques Toutes informations est contenu dans un blastomère précis. Chez certaines espèces, on peut reconstruire la généalogie des cellules grâce à cela. Les blastomères contiennent chacun une information. Mollusque : D si on enlève

A. L’ADN polymérase du phage λ B. La ligase de levure C. L’exonucléase intestinale D. La transcriptase inverse de rétrovirus E. La glucose-6-phosphate déshydrogénase d’E.Coli Question N° 45 : Pour construire une banque d’expression d’ADNc de tissu adipeux dans des phages λ, on fusionne les ADNc préparés à partir des ARN de souris avec les 200 premiers nucléotides de la séquence codante du gène phagique de la béta-galactosidase (βGal). Dans les conditions expérimentales

d’eau et munie d’un bouchon percé d’un capillaire * Plaque chauffante * Thermomètre * Pipette de 1 à 5 ml * Eprouvette graduée de 50ml * Entonnoir * Papier filtre a. Séparer le caillé des autres constituants du lait b. Utiliser le sulfate de cuivre anhydre qui devient bleu c. Extraire les lipides du caillé d. Extraire des protéines solubles du lactose e. Mettre en évidence des ions chlorure f. Mise en évidence des ions chlorure g. Mettre

2.6.2 La thérapie génique o 2.6.3 La thérapie cellulaire 2.1 Historique La dystrophie musculaire de Duchenne (DMD) a été caractérisée en 1861 par Duchenne de Boulogne (ou Guillaume Benjamin Amand Duchenne, 1806-1875) (Duchenne, G. B. 1861). Cette maladie porte son nom même si William John Little (1810-1894) et Edward Meyron (1807-1880) l’ont caractérisée précédemment. Little a publié son livre en 1853 (Little 1853); on y retrouve le contenu de ses observations durant les années

La lactase hydrolyse le lactose en glucose et galactose. On détermine la vitesse d’hydrolyse du lactose par la lactase (β-galactosidase) (E.C. 3.2.1.23) dans les conditions initiales. Il apparaît 0,672x10-2 moles de glucose en 10 minutes. On a introduit dans le milieu 1 mL de solution enzymatique dont la teneur en protéines est de 2,85 g.L-1. a) Ecrire l’équation de la réaction b) Que signifie le terme « conditions initiales », Préciser les conditions de concentrations en substrat. c) Calculer la concentration

structure originale. Mais il était beaucoup plus difficile de comprendre d'autres mutations, localisées dans des positions différentes sur le chromosome et qui suppriment les effets d'une mutation au site A en produisant un change­ ment génétique au site B. Ces mutations de type suppresseur se divisent en deux catégories : celles dues à un changement des nucleotides dans le gène où s'est produite la mutation originale, encore que sur une autre portion du gène (sup­ pression intragénique) et celles se

tubuline. Ceux-ci sont eux-mêmes formés d’une molécule allongée, de masse 110 000 daltons, qui fournit par hydrolyse une vingtaine de sous-unités (protomères). En fait, il existe des protomères a et des protomères b, liés en dimères et assemblés avec jumelage d’une chaîne a et d’une chaîne b s’enroulant parallèlement en disposition hélicoïdale. Les tubulines, pratiquement identiques dans toutes les espèces, ont la propriété de fixer divers ligands: ions magnésium, colchicine et surtout GTP ou ATP, nucléotides