Chromatographie

8 5- Cosédimentation ……………………………………………………..9 II) Résultats et discussion 1- Purification de la stathmine ……………………………………..9 a- La pré-culture ……………………………………………………….9 b- La culture bactérienne ………………………………………….11 c- La chromatographie ……………………………………………..11 2- Caractérisation de la stathmine ……………………………….13 a- Dosage de la stathmine ………………………………………..13 b- Turbidimétrie (test de fonctionnalité) ………………….14 c-Expérience de cosédimentation …………………………….16 Conclusion

acides aminés ainsi que l’ordre de ces acides aminés dans la séquence. Figure 2 : Structure primaire d’un tripeptide Pour cela, nous allons réaliser deux types d’expériences : - une chromatographie de partage sur couche mince afin d’identifier les acides aminés - le titrage pH métrique du tripeptide. 14 I. Chromatographie de partage sur couche mince 1. Principe Lorsqu’une substance est mise en présence de solvants non miscibles A et B, elle se répartit en solution entre ces deux solvants avec des

(System 2000 et Spectrum 100) Spectromètre UV-Visible « Cary 50 » de chez Varian (Agilent) Colorimètre Lovibond 5 systèmes de chromatographie liquide haute performance (Agilent 1100, 1200 et Perkin Elmer) 2 systèmes de chromatographie ionique (Dionex – ThermoFisher) 3 systèmes de chromatographie gazeuse de marque Agilent (6890 et 7890) ainsi qu’un système de chromatographie gazeuse couplé à un spectromètre de masse (quadrupôle simple) de marque Agilent. Un spectromètre d’absorption atomique de marque

s'appuie sur l'utilisation de deux méthodes : la chromatographie en phase gazeuse ( pour une analyse grossière) et la spectrométrie de masse ( pour une analyse plus fine). La chromatographie est donc une technique qui permet :         - de vérifier qu'une substance est pure         - d'analyser un mélange         - de reconnaître les constituants d'un mélange par comparaison  Dans le cadre du dopage, il est intéressant de faire une chromatographie de l'urine après l'avoir traitée. On peut ainsi

avons ensuite dégazé l’ampoule et éliminé de nouveau la phase inférieure. Nous avons ensuite mis la phase noire dans un tube. A l’aide d’une propipette, nous avons prélevé de ce tube, 4 fois 50µL que nous avons ensuite mis sur une plaque de chromatographie. Nous avons ensuite placé cette plaque dans une cuve contenant du solvant de migration composé de 3 volumes d’éther, 1 volume d’acétone et 1 volume de chloroforme pendant 5 à 10 minutes. Voici les résultats que nous obtenons : On observe

moléculaire et le caractère coloré ou non d’une molécule. Repérer expérimentalement des paramètres influençant la couleur d’une substance (pH, solvant, etc.).* Pratiquer une démarche expérimentale mettant en œuvre une extraction, une synthèse, une chromatographie.* (*) Savoir-faire expérimentaux. I- Qu’est-ce qu’une matière colorée ? (p. 67) Activité 1 : Les matières colorantes Correction : A. Une petite histoire de la couleur 1. D’après le texte, les matières colorantes sont utilisées pour l’art

transblot…. Cuves de chromatographie en verre Petits matériels pour la chromatographie (vannes, supports, colonnes en verre …) Pipettes, micro-pipettes automatiques : Eppendorf, pipetman … Cuves en quartz pour spectrophotomètres ou spectrofluorimètres Couteaux diamants… Page 2 sur 14 Inserm - AGENCE COMPTABLE PRINCIPALE ♦ Les matériels présentant une partie consommable progressivement, ce qui rend leur durée de vie relativement courte, tels que : colonnes de chromatographie cassettes radiographiques

verre est du Doliprane. ( Déterminer si le flacon d’alcool 90° en contient bien. 1- Déterminer si la poudre du verre est du Doliprane. Pour analyser, nous pouvons dissoudre l’espèce chimique dans un solvant, puis faire une chromatographie sur couche mince (CCM). Recherchons d’abord la toxicité des solvants utilisés. Acide formique : - Toxicité - Irritation / corrosion Précautions à prendre : utiliser des gants, des lunettes de protection et une hotte. Cyclohexane :

Contrôle de la synthèse d’un ester par changement de réactif : hémisynthèse de l’aspirine à partir d’un anhydride d’acide (doc.D2) Objectifs Réaliser au laboratoire l’hémisynthèse d’un médicament, l’aspirine. Identifier le produit obtenu par chromatographie couche mince. Montrer que par le choix d’un réactif approprié, il est possible d’améliorer le rendement d’une transformation. Présentation de la démarche L'aspirine est un médicament, anti-pyrétique, anti-inflammatoire et analgésique. Il possède

le tableau). L- Il existe une expérience pour prouver que le poivron ne contient en effet pas de capsaïcine alors que l’habanero en contient ? C- Exactement, Léana. Cette expérience nécessite quinze jours au total. Elle est basée sur une chromatographie dont on vérifie les résultats sous une lampe à UV. Cette expérience a été réalisée avec Morgane, notre médecin ici présent. (Les photos défilent en même temps). M- Pour cette expérience nous avons donc broyé un piment et un poivron séparément