Extraction D Un Adn Plasmidique

4.3 1.4.4 1.4.5 Applications 1.4.5.1 Vecteurs Plasmide (ADN bactérien) pBR322 : vecteur de 4363 pb (très petite tailles) composé de 2 sites de restriction uniques situés dans les gènes de résistance (Amp, Tet). Figure 1 Plasmide bon vecteur car petite taille, 2 sites de résistance qui comprennent un seul site de de restriction chacun. 1.4.5.2 Carte de restrictions Une carte de restriction est une représentation localisant sur un ADN les sites de restrictions, après les avoir soumis à une digestion

3) indiquer les extrémités 5’ et 3’ de la molécule A B A, C A B, C, D A B A (dinucléotide), C B A, C, D 5’ 3’ et ceci sur la base de la représentation schématique suivante de la structure de l’ADN : polyanions ADN ARN Exercice 2 La séquence d’un ADN bicaténaire (double brin), correspondant à un gène, est partiellement reportée ci-dessous. 5’ ATACGGGATCCGAGCTCTCGATCGTCTGCAGAAATTCC 3’ 1) Ecrire la séquence et l’orientation du second brin de ce fragment. 3’ TATGCCCTAGGCTCGAGAGCTAGCAGACGTCTTTAAGG

du kit PCR Clean up – Gel extraction (Macherey-Nagel, Hoerd, France). La qualité des ADN est vérifiée par spectrophotométrie (NanoDrop®, Wilmington, USA). Lors d’une contamination en sels, une précipitation des acides nucléiques est réalisée en présence d’acétate de sodium 3M, de glycogène de moule, d’éthanol pur. Le milieu réactionnel est centrifugé après une incubation de 30min à -80°C ou 1nuit à 20°C. Le culot bien sec est repris dans l’eau pure. La concentration des ADN est mesurée par specrophotométrie

Module 1 : Les techniques liées aux acides nucléiques Module 2 : La cartographie Module 3 : Le séquençage Module 4 : Les gènes et leur expression I. LES TECHNIQUES LIEES AUX ACIDES NUCLEIQUES Sommaire Préparation des acides nucléiques Extraction/Purification Les enzymes agissant sur les acides nucléiques Dosage et conservation Synthèse in vitro Séparation des acides nucléiques Electrophorèse Ultracentrifugation Détection, caractérisation et identification des acides nucléique

TECHNIQUES D’EXTRACTION, DE CONTRÔLE DE PURETE ET DE QUANTIFICATION DES ACIDES NUCLEIQUES, 08 I. Extraction, précipitation de L’ADN des eucaryotes et des procaryotes II. Contrôle de la pureté de l'ADN extrait III: Quantification de l'ADN 10 CHAPITRE II : 08 10 LES VECTEURS : PLASMIDES, PHAGES, COSMIDES, YAC, BAC, VIRUS 13 I- Les vecteurs en génie génétique : l'ADN plasmidique II- L'ADN phagique III. Cosmides, YAC et BAC 13 17 20 Chapitre III: ENZYME DE RESTRICTION,

qu'il transmettra à sa descendance.il provient d'une espèce donneuse et il est transmis dans le génome d'une autre espèce dite receveuse La transgénèse est en effet possible grâce à l'universalité de l'ADN et du code génétique : tout être vivant a un ADN différent, mais compatible avec tous les autres. Avec l'universalité du code génétique, un organisme ayant reçu un gène provenant d'une autre espèce peut traduire ce gène normalement, produisant une protéine qui lui est complètement inconnue. Pour appliquer

d'une cellule : 3 × 10-13g Proportion du poids sec : protéines 55 %, lipides 10 %, lipopolysaccharides (LPS) 3 %, peptidoglycane 3 %, ribosomes 40 %, ARN 20 %, ADN 3 %. 1.2.1 L'appareil nucléaire des bactéries Comme tous les protistes procaryotes, les bactéries possèdent un appareil nucléaire constitué d'acide desoxyribonucléique (ADN) qui est le support de l'information génétique. L'ADN chromosomique est constitué d'une double hélice d'ADN circulaire. Cette double hélice est pelotonnée, surenroulée

Exercice 2 : Liaison hydrogène 1. Loi de complémentarité des bases ADN / ADN : 1.1. Etablir les liaisons hydrogènes entre les bases des deux dinucléotides ci-dessous. Orienter les brins. Entourer chaque nucléotide.Entourer une liaison phosphodiester. 1.2. Quelles sont les caractéristiques d'une liaison hydrogène ? 1.3. Quelles seront les conséquences d'une augmentation suivie d'une baisse de température sur la structure d'un ADN double brin ? Quels mécanismes cellulaires mettent en jeu ces processus

sont les suivantes : — préparation de la sonde : extraction de l’ADN de la souche connue et marquage ; — préparation de l’ADN cible, extraction et dépôt sur une membrane ; — hybridation : mise en contact de la sonde avec la membrane dans les conditions de formation de l’hybride stable ; — révélation de la membrane : lavages pour l’élimination de la sonde en excès, d’hybrides non spécifiques, et mise en évidence de l’hybride ADN sonde-ADN inconnu. Basées sur ce principe, plusieurs stratégies

the practices of farmers and the process of production. Keywords: raw milk, traditionnel dairy products, biodiversity, lactic acid bacteria, (GTG)5-PCR, sequencing, bioinformatics. 8 Liste des abbréviations ADN : Acide DéoxyriboNucléique ARN : Acide RiboNucléique ADNr: ADN ribosomal ARNt: ARN de transfert AFLP: Amplified Fragment Length Polymorphism AFNOR: Association Française de Normalisation ADP: Adénosine Diphospahte API: Analytic Programme Index ATP: Adénosine Triphosphate BCCM: Belgian