Plasmide

herbicide) la multiplication du transgène le transfert de cette construction génétique dans un plasmide, petite boucle d’ADN d’origine bactérienne servant de "malette" de transfert du gène d’interêt. l’introduction du plasmide modifié dans le génome de la cellule, par un vecteur biologique (un Agrobacterium ou un virus "désarmé") ou par un procédé mécanique (projection de microbilles de tungstène portant le plasmide). Il est également possible d’introduire la construction génétique directement, par micro-injection

chaîne par polymérase (PCR en anglais pour Polymerase Chain Reaction) et/ou des enzymes de restriction dans un plasmide (qu'on appelle vecteur d'expression). Ce plasmide peut avoir des éléments de séquences promotrices spéciales pour diriger la production de la protéine en question et peut aussi avoir des marqueurs de résistance antibiotique pour aider à suivre le plasmide. Ce plasmide peut être inséré dans des cellules, soit de bactérie, soit d'animal. Introduire de l'ADN dans des cellules bactériennes

bactérienne. 6- Différencier les bactéries selon la composition de leur paroi (Gram + vs Gram -), leur attribuer des caractéristiques biochimiques et des propriétés physiologiques. 7- Différencier le chromosome bactérien du plasmide et montrer l’importance des plasmides en génétique microbienne. 8- Différencier les fimbriae du pilus sexuel en termes de fonction. 9- Décrire le processus de la sporulation (ou cycle sporal). 10- Donner des exemples pertinents de bactéries en rapport avec les structures

grande vitesse de prolifération de ces dernières pour reproduire à l'identique un très grand nombre de copies de ce fragment d'ADN. Pour cela, le fragment d'ADN est au préalable introduit dans une construction que l'on appelle vecteur ou plasmide. Ce plasmide est une molécule d'ADN circulaire qui permet à la fois d'introduire la séquence d'ADN à étudier dans le microorganisme récepteur mais aussi d'assurer le maintien de ce fragment d'ADN d'intérêt dans la cellule hôte de génération en génération

bactérienne 8 – Le génome bactérien • Deux structures supports de l’information génétique Le chromosome bactérien Les plasmides Le Chromosome bactérien • Chromosome unique le plus souvent • ADN bicaténaire circulaire – 1 à 6 Mb • Formant un nucléoïde – Visible en microscopie électronique – Chromosome superenroulé + protéines + ARN + enzymes Les plasmides Origine de réplication ADNdb • • • • • ADN circulaires (ou linéaires) de taille réduite Réplication autonome

I- But : Le but de ce TP est d’obtenir l’isocitrate déshydrogénase (IDH) par voie recombinante. On utilise comme système d’expression E.coli (souche JM109) transformé par le plasmide pGEX-2T dans lequel on a inséré le gène de l’IDH. L’IDH recombinante exprimée est en fusion avec la glutathion-S-transférase (GST) à des fins de purification par chromatographie d’affinité sur une colonne glutathione sepharose 4B. L’IDH peut être étudiée et dosée après clivage de la protéine de fusion par la thrombine

hours before western blot, flow cytometry analysis or sporozoite infection. The TRIPΔ3-CMV-AQP9 plasmid was constructed by inserting the human AQP9 cDNA sequence in the TRIPΔ3-CMV vector (Ref). Vector particles were produced by transient calcium phosphate cotransfection of 293T cells by the TRIPΔ3-CMV-AQP9 plasmid, an encapsidation plasmid and a vesicular stomatitis virus envelope expression plasmid, as described. Cells were transduced by incubating 1/1000 of concentrated viral preparation 3h before

obtenu grâce aux enzymes de restriction va être introduit dans un plasmide   Le transfert indirect.(ou transfert biologique)   Le transfert biologique fait intervenir une bactérie : l?agrobacterium tumefaciens. Cette bactérie a la capacité de modifier le matériel génétique d?une plante en introduisant les gènes contenu dans son plasmide .Cette bactérie est la cause de tumeurs . il faut donc enlever les gènes pathogènes du plasmide et ensuite introduire le gène d?intérêt dans celui ci. Ceci ce fait

dans l’alimentation animale, ni dans les champs. » Les plantes transgéniques, les grandes étapes: 1965 les enzymes de restriction* permettant de découper l'ADN en des points précis sont découvertes. 1973 : Identification du plasmide** Ti dans une bactérie. Ce plasmide permet d' accueillir le gène porteur du caractère recherché, qu’il est en mesure d’introduire dans le génome d’une plante. 1983 : Première plante transgénique obtenue indépendamment par quatre groupes: l' université de Washington

; (* attention * bien comprendre la différence entre les points 3 et 4 est essentiel) (5) ce que sont les plasmides, quel est leur rôle en général chez les bactéries et en génie génétique et spécifier le nom du plasmide utilisé dans ce laboratoire;(6) Inscrivez toutes vos références selon la méthode expliquée dans le document “Comment rédiger un rapport scientifique de qualité” disponible sur Moodle.