Substrat enzymatique

Climat 2009;146:41-47 PROTOCOLE D’ANALYSE MICROBIOLOGIQUE DE SUBSTRATS THERMAUX, BOUE THERMALE ET SÉDIMENTS* C PIGASSE1, C ROQUES1, JF MERIC2 Résumé La qualité microbiologique de la boue thermale au sein des établissements nécessite une attention particulière afin de définir son état sanitaire. Exposée à un très large public, il est dans l’intérêt des stations thermales d’assurer la qualité microbiologique de leurs substrats thermaux ainsi que son maintien. L’élaboration du présent protocole

But de la manipulation Le but de ce TP est avant tout de mettre en évidence la présence d'anticorps spécifique anti-BSA dans le sérum d'un lapin immunisé par le BSA et de titrer la réactivité anticorps par une technique immuno-enzymatique l'ELISA cela va permettre de quantifier les anticorps anti-BSA. Ce TP a aussi pour but de nous familiariser avec le matériel utilisé pour l'ELISA et de nous exercer à faire des dilutions. Principe de l'ELISA Tout d'abord on sensibilise les puits en

carbonylés très réactifs II.5. Dégradation de Strekker II.6. Formation de polymères bruns II.7. Dégradation de l’acide ascorbiqueIII Facteurs influençant le brunissement non enzymatique III.1. Nature des sucres réducteurs III.2. La température III.3. Activité de l’eau Aw III.4. pHIV Evaluation et prévention du brunissement non enzymatique IV.1.

RESISTANCE AUX ANTIBIOTIQUES MECANISMES Pr. Émérite A. PHILIPPON Faculté de Médecine Paris Descartes MECANISMES DE RESISTANCE (ACQUISE OU NON) Mécanismes biochimiques . Imperméabilité . Efflux . Modification enzymatique de l'antibiotique . Modification de cible (affinité ou substitution de cible) . Protection de la cible ? La bonne connaissance des mécanismes découlent du mode d’action MODES D’ACTION DES BETA-LACTAMINES BLA Cible PBP = Penicillin Binding Protein PLP = Protéines

se fait à condition que : - ces molécules soient dotées d’une énergie suffisante ; - qu’elles se rencontrent selon une direction et une orientation relatives très précises. L’état de transition correspond à un complexe formé par le réactif et le substrat. # R+S Figure 1.1 [ R-S ] P On représente l’état de transition à partir de modèles utilisés pour les molécules, mais il faut savoir que dans ces complexes les longueurs de liaison et les angles de liaison peuvent être très différents

Certains éléments ne sont retrouvés qu’à l’état de « traces » : Mn, Zn, Co, Ni, Cu, Mo… Ce sont des oligo-éléments (ou micro-éléments), nécessaires au métabolisme microbien, car ils interviennent en tant que cofacteur ou activateur de réactions enzymatiques. Les besoins élémentaires sont différents d’une espèce à une autre, en fonction du milieu de vie notamment. 1.1.1. Source de carbone Les exigences nutritionnelles en carbone conduisent au classement des micro-organismes en deux grandes catégories :

Expérimentation assistée par ordinateur TP Ex.A.O. Activité 2A : métabolisme des levures et conditions du milieu. La respiration. Cette activité permet de définir le métabolisme cellulaire, à travers la capacité d’organismes unicellulaires à consommer un substrat nutritif (saccharose) en utilisant du dioxygène, selon les processus de respiration. On pourra montrer un exemple de l’influence du milieu sur ce métabolisme. En utilisant une seule souche de levure sauvage (levure de boulangerie) et en variant la

plastes sont des organites autonomes qui sont responsables de l’hérédité maternelle cytoplasmique. Le chloroplaste possède une double membrane comme la mitochondrie. Entre ces deux membranes on trouve une phase aqueuse où il n’y a pas de réactions enzymatiques. La membrane externe est relativement perméable (elle est composée de protéines et de phospholipides). La membrane interne est imperméable : c’est une barrière sélective. Dans cette membrane, on trouve un fort taux de protéines, l’organisation

phase solide. Ce sont les plaques Elisa qui vont servir de phase solide. On introduit d'abord les antigènes dans les puits, puis on met les anticorps. La détection se fait par une enzyme (habituellement la peroxydase). On rajoute ensuite un colorant (substrat de l’enzyme) pour voir le complexe immun (liaison antigène-anticorps). En fonction de la spécificité de la réaction et du type de résultats que l’on souhaite obtenir, on distinguera 4 différentes techniques : -ELISA directe -ELISA indirecte (la

Connaître les méthodes de dilution * Mise en évidence de la présence d’anticorps spécifiques anti-BSA (Albumine Sérique Bovine) dans le sérum d’un lapin immunisé par la BSA * Titrage de la réactivité anticorps par une technique immuno-enzymatique (ELISA). Principe de l’ELISA Le principe de la réaction est le suivant : on fixe l’antigène (BSA) sur les parois d’une plaque de polystyrène à 96 puits. L’antigène s’adsorbe spontanément à pH alcalin sur le support plastique spécialement étudié