Tp Hydrolyse

TP SPECIFICITE DES ACTIONS ENZYMATIQUES: LES GLYCOSIDASES | I – BUT Le but de ce TP est de déterminer la structure d’un diholoside par l’action enzymatique spécifique des glycosidases et de mettre en évidence son pouvoir réducteur éventuel par le test à la liqueur de Fehling. II – Principes Action des glycosidases : Les glycosidases font partie de la famille des hydrolases c'est-à-dire qu’elles catalysent la rupture de liaisons osidiques afin de libérer un ou plusieurs composés

TP N°2 : Dosage des sucres réducteurs par le DNS • But : - Préparation d’une gamme d’étalonnage en sucre interverti. - Dosage d’un sucre non réducteur : le saccharose. • Principe du dosage par le DNS: Le DNS (3,5-acide dinitrosalicylique) à chaud et en présence de sucres réducteurs développe un produit réduit de couleur rouge-brune l’acide 3-amino-5-nitrosalicylique. La technique du DNS est un moyen de détermination de la teneur en sucres réducteurs libres présents dans

Hydrolyse basique (saponification) d’un ester ou d’un triester partie D du programme de chimie : Comment le chimiste contrôle-t-il les transformations de la matière ? F. Passebon 27 mars 2007 Hydrolyse basique (saponification) d’un ester = R-COO-R’ + {Na+ + HO−} = {R-COO− + Na+} + R’-OH carboxylate de sodium Avec de la potasse KOH, au lieu de la soude NaOH, remplacer Na+ par K+ On obtient alors un carboxylate de potassium. Hydrolyse basique (saponification) d’un triester

Compte rendu du TP n°1 1°) Nous cherchons à préciser l’action d’une catalyse enzymatique c’est-à-dire la transformation de l’amidon en glucides simples grâce à l’intervention d’enzymes tel l’amylase. Pour cela, nous allons réaliser une étude comparative de l’hydrolyse chimique et enzymatique de l’amidon, en supposant qu’il y a une différence de vitesse de réaction entre ces deux types d’hydrolyse. (L’hydrolyse étant une réaction permettant la digestion de l’amidon) 2°) Pour répondre à ce problème

intestinale de veau, la réaction sera suivie en dosant les produits apparus dans le milieu lorsque l'enzyme est mise en présence du substrat. Pour des raisons de commodité, ce dernier est le p-nitrophényl phosphate (PNPP), composé incolore qui libère par hydrolyse du p-nitrophénol (PNP) jaune en milieu alcalin et dosable directement par spectrophotométrie à 410 nm. NO2 OPO32- H2O NO2 OH HPO42- PNPP incolore PNP jaune λ max= 410 nm La densité optique de la solution à 410 nm est proportionnelle

intervenir dans l'équilibre de la réaction. De plus, une des particularités des enzymes est de rester intacte au cours de la réaction ce qui lui confère la capacité de catalyser plusieurs réactions successives. La β-galactosidase est une enzyme qui hydrolyse le lactose en glucose + galactose et qui a une spécificité large ce qui lui permet d'hydrolyser les β-galactosides tels que l'ONPG, également appelé le 2-nitroplényl-β-D-galactopyranoside, en galactose + ONP (ou 2-nitrophénol), un produit jaune en

matières osseuses. (Annexe 3) La gélatine obtenue par hydrolyse acide du collagène, est la gélatine de type A. La gélatine est produite à partir de peau de porc principalement, ou de peau de bovins et de poissons. Deux types de gélatines sont produites à Angoulême : les grains (hydrolyse partielle) et le collagène hydrolysé (hydrolyse totale) Les grains ont une force en gelée (le bloom) tandis que le collagène hydrolysé n’a pas cette propriété, de plus, il est soluble à froid

É É É Enzymologie C. COMPARAISON AVEC LES CATALYSEURS CHIMIQUES C. Document 1 : Mise en évidence expérimentale de l’importance d’un catalyseur L’amylase salivaire : Action de la salive sur l’amidon. Expérience 1 Hydrolyse par la salive Empois d’amidon Salive Expérience 2 Hydrolyse par le chlorure d’hydrogène Bain marie à 37° C Tube 1 Tube 2 Empois d’amidon + quelques gouttes de HCl Le mélange est porté à 100° pendant 1h C Pour chaque expérience, on effectue 2 prélèvements. Un test à

Hydrolases : liaisons ester, résidus glycosyle, etc. • EC 3.2.1.4 1,4 (1,3 ;1,4)ß-D-glucan 4-glucanohydrolase = cellulase Glucose(n) = Glucose(n-1) + D-glucose 4 Lyases : catalysent l’enlèvement ou l’addition d’un groupement autrement que par hydrolyse • EC 4.1.1.39 3-phospho D glycérate carboxy-lyase [dimerizing] = RubisCO RuBP + CO2 = 2 A3PG 5 Isomérases : • EC 5.3.1.1 D-glycéraldéhyde 3-phosphate céto-isomérase = Triose phos- phate isomérase Glycéraldéhyde 3 phosphate = Dihydroxy acétone

acides aminés. Triple hélice de collagène Cette hélice est très riche en proline, glycine et hydroxyproline qui sont trois acides aminés parmi d'autres formant les chaînes peptidiques des fibres de collagènes. Pour obtenir de la gélatine, on hydrolyse le collagène par deux traitements possibles (soit un traitement acide, soit un traitement alcalin mais nous ne les traitons pas dans ce sujet). Il y a alors rupture des interactions hydrogènes entre les fibres de collagènes sans dénaturation des