Trypsine

protéines, ainsi que de glycosaminoglycanes. http://fr.wikipedia.org/wiki/Matrice_extracellulaire Les cellules vont se décoller et passer en suspension. On utilise : des protéases : comme la collagénase qui hydrolyse spécifiquement le collagène, la trypsine, peu spécifique, qui est plutôt utilisée pour le repiquage des cultures, elle coupe les protéines contenant lysine ou arginine. des glycosidases : comme la hyaluronidase qui hydrolyse l'acide hyaluronique et les protéoglycanes 2.Méthodes de séparation

donné naissance à un enfant atteint de la maladie. 2 : Le dépistage possible à la naissance sur une goutte de sang prélevé au talon du nourrisson réalisé le troisième jour de sa naissance. (L'analyse sera basée sur le dosage de la trypsine immunoréactive. La trypsine est un enzyme d'origine pancréatique dont le taux sanguin est très souvent trop élevé à la naissance chez l'enfant atteint de mucoviscidose). 3 : Le teste de la sueur qui consiste à déterminer la teneur en sel de la sueur effectué

actives. Les protéases La trypsine : C’est la plus abondante (20% des protéines pancréatiques) ; activée à partir du trypsinogène par une entérokinase (libérée par sels biliaires) et détermine l’activation des autres zymogènes pancréatiques. Il s’agit d’une peptidase (agit au milieu des chaînes peptidiques) qui possède le site catalytique Ser /His/ Asp et reconnaît comme substrat spécifique les acides aminés hydrophiles. Autres peptidases : Activées par la trypsine et possédant le même site catalytique

saccharases, des maltases, des lactases et des peptidases. -Le suc pancréatique arrive à l’intestin grêle par différents canaux. Ce liquide incolore au PH neutre est le plus important pour la digestion. Il contient plusieurs enzymes : deux protéinases (la trypsine et la chymotrypsine) découpent les protéines, une lipase décompose les graisses, l’amylase achève l’hydrolyse de l’amidon en maltose qui sera ensuite transformé en sucres simples assimilables (glucose et fructose). -------------------------------------------------

catalyse enzymatique. | Tracez les courbes des activités des enzymes en fonction du PH. L'activité est mesurée en unités arbitraires. Vous utiliserez une couleur par courbe. pH | 1 | 1,2 | 1,4 | 1,6 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 8,5 | 9 | 10 | trypsine | 0 | 0 | 0 | 0 | 0,5 | 2 | 9 | 11,7 | 12 | 11 | 5 | 3 | 1 | 0 | maltase | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0,2 | 1 | 2,2 | 4,5 | 8 | 11 | 7 | 1,1 | pepsine + S1 | 0 | 9 | 7 | 2,5 | 1,5 | 0,9 | 0,7 | 0,3 | 0,2 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | pepsine + S2 | 0

l’interprétation correcte des anomalies chromosomiques. Coloration Giemsa standard TECHNIQUES DE MARQUAGE Méthodes classiques du marquage : Objectif : faire apparaître des séries de bandes spécifiques sur chaque chromosome Bandes G (trypsine/giemsa) (dénaturation enzymatique) Bandes R (chaleur/giemsa) Bandes Q (quinacrine/UV) Bandes R Bandes G Bandes Q TECHNIQUES DE MARQUAGE Méthodes classiques du marquage / Bandes R Technique Dénaturation thermique à 87° Coloration

1014 Anhydrase carbonique : 106 Les enzymes sont hautement spécifiques de la réaction catalysée et du substrat transformé. Cette spécificité est toutefois relative : Exemples : enzymes protéolytiques subtilisine (origine bactérienne) : liaison X-X trypsine : Arg-X et Lys-X thrombine : Arg-Gly I.A.2) Constitution d'un complexe enzymatique On appelle holoenzyme l'ensemble apoenzyme + cofacteur : l'apoenzyme est la partie protéique thermolabile Peut être un chaîne ou un oligomère le cofacteur est la

ont été comparés à ceux de la base de données SWISS-2-DPAGE (http://expasy.org/ch2d). Après leur élution des gels, les protéines d'intérêt ont été soumises à une digestion par la trypsine dans un mélange constitué de bicarbonate d'ammonium 25 mM et de la trypsine 0,02% (p/v). Les peptides résultant de l'action de la trypsine sont identifiés par spectrométrie de masse MALDI-TOF. Les empreintes peptidiques obtenues sont comparées à la base de données Suiss-Prot ave le moteur de recherche MASCOT. 1/ Préciser

-stérilité ou diminution de la fécondité -Hypoxie -hypoxémie -absence de spermatozoïde dans le sperme - absence d’enzymes digestives pancréatiques au niveau du duodénum - une sueur anormalement salée « maladie du baiser salé » -présence de trypsine immuno-réactive en quantité élevée dans le sang des malades ° Traitements : p45 NT - antibiotiques pour diminuer l fréquence des infections respiratoires - bronchodilatateurs pour faciliter la respiration - kinésithérapie respiratoire quotidienne

dinitrophényl AA réactif de Sanger ( formation d’un peptide DNP) -Coupures spécifiques de peptides Outils chimique : Bromure de cyanogène, Acide 2-nitro-5-thiocyanobenzoique, hydroxylamine Outils Biologique : Exopeptidase, endopeptidase, trypsine(enzyme de l’estomac), chymotrypsine -Cartes peptidique Digestion de la proteine en peptides Permet de distinguer des differences en AA dans une proteine Electrophorèse bi dimensionnelle 1- Séparation par le point isoelectrique (pl) :