La Catalyse Enzymatique Hydrolyse

2 : l’activité enzymatique. I- qu’est-ce qu’une enzyme ? C’est une protéine soluble, elle augmente la vitesse des réactions biochimiques sans subir de modifications. Elle est encore fonctionnelle à la fin d’une réaction. Elle agit à concentration très faible et est toujours synthétiser par une cellule vivante. C’est donc un biocatalyseur. II- propriétés des enzymes. A- spécificité d’action. Une enzyme ne catalyse qu’un seul type de réaction : * soit une hydrolyse * soit une

constante de Michaelis et la Vmax sont deux constantes qui caractérisent un couple enzyme/substrat. Le but de ces deux journées de TP serra de déterminer ces constantes et de dégager les caractéristiques et les différents aspects d'une réaction enzymatique. Extraction de la -galactosidase à partir de la bactérie Echerichia-coli L'étude de la β-galactosidase est faite sur un extrait cellulaire qu'on prépare à partir d'une patte bactérienne. Les bactéries sont cultives de façon habituelle

plus de 100 acides aminés. → plusieurs milliers. Assument des fonctions essentielles dans la fonction du vivant : * métabolisme de la cellule : la somme des réactions biochimiques qui se déroule dans l'organisme. Les réactions doivent être catalyser, dans le vivant cela se fait grâce aux enzymes. Dans les enzymes, il y a toujours une partie protéique. * Transport de substances nécessaires à la vie → Hémoglobine. * Le mouvement des organismes : les protéines actine et myosine des

chaleur. Il ne faut pas la confondre avec la phosphorescence ou la fluorescence (propriétés qu'ont certains corps, d'absorber un rayonnement et de l'émettre à nouveau). En effet, la luminescence des êtres vivants est due à une réaction chimique enzymatique entre la luciférine et la luciférase. Les animaux et végétaux bioluminescents font différentes utilisations de ce phénomène, mais l'Homme en est-il aussi friand? C'est une des questions auxquelles nous allons répondre au cours de ce dossier. Dans

en étudiant l’influence de la concentration d’enzyme et de substrat sur la cinétique enzymatique de la Trypsine. II.PRINCIPE : La trypsine est une enzyme digestive du suc pancréatique qui a pour but de digérer les protéines. C’est une endonucléase qui hydrolyse les liaisons peptidiques dans lesquelles un acide aminé basique (lysine, arginine) engage sa fonction acide. Son activité enzymatique et son mécanisme d’action peuvent être étudiés à l’aide des substrats synthétiques comme

sur la santé : L’α-lactalbumine est sécrétée dans le lait mais sa principale fonction biologique est intracellulaire au niveau de la glande mammaire en réponse à la prolactine (hormone), selon le schéma suivant : le complexe enzymatique qui catalyse l’étape finale de la biosynthèse du lactose dans le lumen de l’appareil de Golgi, est composé de la β1,4-galactosyltransférase (GT) et de l’α-lactalbumine (BLA). La GT sous sa forme libre, est impliquée dans les modifications post-traductionnelles

l'histidine Réalisation d'une solution tampon 4 5 Séparation de molécules par chromatographie d'exclusion sur colonne 6-9 Cinétique enzymatique Bases de cinétique enzymatique Etude de la β Galactosidase 10 – 11 11 - 13 Modèles moléculaires 14 – 17 Annexes à détacher et à inclure ans le compte rendu : Tableau cinétique enzymatique Tableau chromatographie d’exclusion -1- TP Biochimie LV 232 – Année 2009 - 2010 ANNEXE (à lire impérativement avant les TP) SPECTROMÉTRIE

absorption intestinale,  Apports (glycémie ) et consommation cellulaire () Structure et activité des enzymes. A) La notion d’enzyme. 1) Une tentative de définition. 2) Les conditions d’une catalyse enzymatique. TP1 : Définir la notion d’enzyme Les enzymes sont des catalyseurs. a) b) Activité enzymatique et conditions du milieu. Les enzymes sont des biocatalyseurs. Une double propriété des enzymes. Spécificité de substrat et spécificité d’action. B) Le mode d’action des enzymes. 1) Mesurer

avec du fioul lourd en ont démontré la faisabilité industrielle. 2.1.1.3 Technologie 2.1.1.3.1 Hydrolyse L’hydrolyse est appliquée industriellement à l’amidon des céréales avec deux procédés : — la voie humide : le grain est moulu et ses constituants (son, gluten, amidon...) sont séparés de façon classique pour le son et en partie par lavage. Seul l’amidon est traité au cours de l’hydrolyse enzymatique puis fermenté. Les coproduits sont vendus séparément sur des marchés spécifiques ; — la voie sèche

catalysée par une estérase : hydrolyse d’une liaison de type ester pour donner un alcool et un acide carboxylique Dans cette classe d’hydrolase, environ 80 enzymes sont représentées. Le groupe E.C. 3.1.1.74 est représenté par la cutinase, découverte par Kolattukudy en 1984. 2. Généralités sur la cutinase La cutinase est une enzyme hydrolysant la cutine en monomère de cutine en présence d’H2O (Fig. 2). Fig. 2. Réaction catalysée par la cutinase : hydrolyse d’une cutine en monomère de