Glucose Oxydase

Genre Micrococcus Bacille à Gram négatif : Oxydase -> Que pour les bactéries Gram - Oxydase négative : Famille des Enterobacteriaceae : Genre des Salmonella Genre des Escherichia Sérogroupage des Escherichiae Coli Sérogroupage des autres Escherichia Genre Shigella Genre Klebsiella Genre Enterobacter Genre Serratia Genre Proteus Genre Morganella Genre Providencia Genre Hafnia Oxydase positive : Pseudomonas Vibrio Aeromonas colonies de TYPE S (lisse):

l'ensemencement de la galerie, on identifie notre souche comme suit : • Aérobie strict, non fermentant • Oxydase négative • Catalase positive • Décarboxylation de la lysine et Pornithine négative • Arginine dihydrolase négative • Nitrate réductase • Gélatinase négative • Hémolyse négative • Acidification sans production du gaz du glucose, mannose, galactose, xylose, arabinose et lactose. 7 II. EPIDEMIOLOGIE : 1. Réservoir : a. L'environnement

l’activité de la glucose-6-phosphatase, l’activité de la cytochrome C oxidase. Ces dosages nous ont permis de mettre en évidence la localisation subcellulaire de l’enzyme dosée. Ce TP nous a permis de définir ce qu’est une enzyme marqueur et de replacer chacune des activités dosées dans leur voie métabolique. Matériel et méthodes 1- Réalisation de gamme étalon (incubée en même temps que les milieux réactionnels) Lors de la recherche de l’activité de la glucose-6-phosphate, 9 tubes

matières But de l’épreuve! Théorie! Gram Description macroscopique et microscopique Catalase Oxydase Mobilité Hémolyse O-F Mannitol KIA Macconkey Réduction des nitrates Méthyle rouge Antibiogramme Galerie API 20E 3 3 3 4 5 5 6 6 7 8 8 9 9 10 11 11 Procédure! Observations et résultats! Analyse! Description macroscopique et microscopique Gram Catalase Oxydase Mobilité Hémolyse O-F KIA Macconkey Mannitol Méthyle rouge Réduction des nitrates

Déterminer la voie empruntée par la bactérie pour dégrader le glucose. Le métabolisme fermentaire engendre la formation d’acides ou d’alcool alors que le métabolisme oxydatif n’en produit pas. L’épreuve de HUGH et LEIFSON permet de déterminer la voie empruntée en utilisant des géloses molles, faiblement peptonnées et présentées en culot (M.E.V.AG.).  Technique : - 2 tubes de milieu sont régénérés par chauffage aux bains-marie puis additionnés de glucose puis solidifiés. - L’ensemencement se fait par piqûre

composants des molécules : glucose, galactose, fructose (oses simples les plus courants) glucose + galactose = lactose (diholoside) glucose + fructose = saccharose (diholoside) glucose + glucose = cellobiose / cellulose (diholoside) Les polyholosides sont composés de plusieurs molécules comme le glucose : Exemple : l’amidon  l’amylose = 250 glucoses  l’amylopectine = 1000 glucoses Exemple chez l’homme : le glycogène (réserve de glucose servant de ‟carburant” pour le

signifie que le test est négatif et qu’il n’y a pas de sucre réducteur. Dans le flacon B seulement il y a eu hydrolyse de l’amidon. Cette macromolécule a été hydrolysée en un autre glucide, le glucose, dont les molécules sont beaucoup plus petites. (C6 H10O5)n + nH2O Amidon (glucide non réducteur) nC6H12O6 glucose (glucide réducteur) Dans le flacon A, cette hydrolyse n’a pas été mise en évidence au bout d’une heure car il s’agit d’une réaction très lente. Dans le flacon B, c’est la présence d’acide

monosaccharides. Ex : le glucose C6H12O6. Ce sont des molécules glucidiques, les plus simples ou monomères (unité de base), ils possèdent les fonctions alcool primaire et secondaire et des fonctions aldéhydes ou cétone. La classification des oses reposent d’une part sur le nombre d’atome de carbone présent dans les molécules, d’autre part sur la d’une fonction aldéhyde ou d’une fonction cétone. Les principaux sont : Pentoses en C5 = ribose, désoxyribose ; C5H10O5 ; hexoses en C6 = glucose, galactose, lévulose

TP SUR LES SUCRES Etude des fraises Tagada Haribo Composition des fraises ( figurant sur le paquet ) : glucose , saccharose , gélatine , acidifiant , colorants rouges . But du TP : vérifier la présence de certains sucres dans leur composition par chromatographie sur couche mince doser la quantité de glucose par spectrophotométrie Ces manipulations sont réalisables en 2 h . Elles ont été élaborées par B.Discamps (Lycée Bel Orme , Bordeaux ) et F.Rivoal (Lycée Saint Louis , Bordeaux) et proposées

peroxyde. Résultat Interprétation Bulles Positif Tableau 4. La fermentation des sucres de la bactérie inconnue 1. Nous avons ensemencés 3 bouillons contenant une cloche de Durham. Résultat Interprétation Lactose : Jaune Fermentation Glucose : Jaune Fermentation Sucrose : Mauve Pas de fermentation Tableau 5. La coagulase de la bactérie inconnue 1. Un échantillon de la colonie a été déposé dans une petite quantité de plasma de lapin. Résultat Interprétation Pas de caillot Négatif